[发明专利]南海真菌中新鹿角缩酮类化合物及其在制备抗高血压药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及南海内生真菌鹿角菌Xyloraria sp.2508中已分离鉴定并筛选到一系列鹿角缩酮(xyloketals)类化合物及其在制备抗高血压药物中的应用。

背景技术

自从1929年从真菌中发现青霉素以来，真菌的代谢产物成为了药物的丰富来源，绝大多数临床应用的抗生素都来源于真菌和细菌，真菌的代谢产物还有其他的药用价值，如抗肿瘤，治疗心血管疾病，免疫调节剂等。由于海洋环境的特殊性，海洋微生物种类繁多，来源广泛，筛选获得率高，根据John教授在2005年《Natural Product Reports》的报道，2003年发现海洋天然产物新化合物中，海洋微生物是主要来源之一(另外包括海绵和腔肠动物)。海洋真菌能提供陆生真菌无法提供的代谢产物。

植物内生真菌(Endophytic fungi)生活在高等植物的组织中，是植物微生态系统中的天然组成成分，在进化过程中与宿主建立了和谐的共生关系，据保守的估计内生真菌的种类繁多，大约有1.5×10⁶种，由于数量庞大，而且与其他生物之间紧密的生态关系，使这类真菌成为潜在的具有产生丰富的次级代谢产物的来源。国际上这方面的研究从八十年代以来呈加速发展的趋势，国内从海洋微生物也发现一批新的活性物质(Lin YC et al，J.Org.Chem.；Lin YC etal.Tetrahedron 2000)。

发明内容

本发明的目的在于提供一类新的来源于海洋真菌的具有潜在药用价值的化合物在高血压预防治疗方面的应用价值。

本发明的技术方案如下：

从南海内生真菌鹿角菌Xyloraria sp.2508中已分离鉴定并筛选到一系列鹿角缩酮(xyloketal A-F)类化合物中，结构分别如下：

本发明的化合物可以从真菌2508的发酵液中提取分离得到，所用的真菌2508已保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC，中国武汉大学校内)，保藏号为CCTCC NO：M202029，保藏日为2002年08月03日。

本发明化合物鹿角缩酮化合物A-F(xyloketal A-F)可从真菌2508的发酵培养液中提取分离得到，制备方法的具体步骤如下：

a.真菌2508的种子培养：

培养基按重量比为：葡萄糖0.5-1.5，酵母提取物0.05-0.15，蛋白胨0.1-0.3，琼脂1-1.5，氯化钠3-5，水100，制成试管斜面，挑取菌株接入斜面，30-35℃培养5-7天；

b.真菌2508的发酵培养：

发酵培养基按重量比为：葡萄糖0.5-1.5，酵母提取物0.05-0.15，蛋白胨0.1-0.3，琼脂1-1.5，氯化钠3-5，水100，将斜面中培养好的菌株挑入发酵培养基，于室温25-35℃静置1-2个月，或者于200L全自动发酵罐培养90小时；

c.将上述培养好的发酵液过滤除去菌体；

d.将发酵液加热浓缩至原液体积的1/3-1/5，用乙酸乙酯萃取多次，浓缩乙酸乙酯萃取液，在硅胶柱中进行色谱分离，以1％-100％乙酸乙酯/石油醚为洗脱剂梯度洗脱。

e.收集8％-30％的乙酸乙酯/石油醚洗脱，纯化得到Xyloketal A-F化合物.

本发明的化合物对KCl和苯肾上腺素(Phenylephrine，Phe)引起血管环收缩实验中发现具有明显的抑制作用，同时对高血压大鼠模型如预期观察到体内应用xyloketals系列化合物可产生降压效应。

下面结合实施例对本发明作进一步说明。

附图说明

图1为预孵不同浓度Xyloketal B对KCl引起大鼠胸主动脉环收缩反应的影响；

图2为预孵Xyloketal B(20μM)和L-NAME(100μM)对Phe诱发的去内皮血管环收缩反应的影响。

具体实施方式

实施例1

化合物可以通过以下步骤制备得到：

aa.真菌2508的种子培养：

培养基按重量比为：葡萄糖0.5-1.5，酵母提取物0.05-0.15，蛋白胨0.1-0.3，琼脂1-1.5，氯化钠3-5，水100，制成试管斜面，挑取菌株接入斜面，30-35℃培养5-7天；

d.真菌2508的发酵培养：