[发明专利]一种检测大肠杆菌的新型荧光生物传感器的制备方法

权利要求书

1、一种检测大肠杆菌新型的荧光生物传感器的制备方法，包括下述步骤：

(a)利用制备好的磁性颗粒经表面生物功能化修饰上二抗，用荧光素标记一抗，带有标记的一抗与二抗结合形成抗体复合物，用抗体复合物处理大肠杆菌0157：H7抗原样品，形成抗原-带标记的一抗-二抗复合体。

(b)经过磁分离与洗涤过程后，利用甘氨酸-盐酸缓冲液在一抗和二抗之间水解，形成带负电的荧光标记的抗原抗体结合物。

(c)分离后带负电的抗原抗体结合物与阳离子共轭聚电解质(CCP)特异性结合后，形成超分子识别体系，经CCP光激发导致共振能量转移(FRET)，原荧光标记信号出现超级放大，实现荧光生物传感器功能。

2、根据权利要求1所述的生物传感器制备的方法，其特征在于运用荧光素标记的一抗与二抗以及大肠杆菌0157:H7抗原形成复合体。

3、根据权利要求1所述的生物传感器制备的方法，其特征在于所述步骤(c)中的荧光信号放大是通过带负电的抗原抗体结合体与阳离子共轭聚电解质的特异性结合后经CCP光激发导致共振能量转移来实现的。

4、根据权利要求1、3所述的一种检测大肠杆菌荧光的新型生物传感器的制备方法，其特征在于所述步骤(c)中特异性的结合可以调整点样密度从而实现微阵列化，以提高检测能力。

5、根据权利要求1、3或4所述的生物传感器的制备方法，其特征在于运用磁粒原位法和剪切点样法两种制备方法来实现荧光生物传感器的功能。