[发明专利]一种镰孢菌纤溶酶及其制备方法有效
| 申请号： | 200810034360.8 | 申请日： | 2008-03-07 |
| 公开（公告）号： | CN101525611A | 公开（公告）日： | 2009-09-09 |
| 发明（设计）人： | 吴斌;吴黎诚;陈代杰;夏玉叶;戈梅;罗敏玉;殷瑜;杨志钧;杨天;金文翔 | 申请（专利权）人： | 上海来益生物药物研究开发中心有限责任公司;浙江医药股份有限公司新昌制药厂 |
| 主分类号： | C12N9/68 | 分类号： | C12N9/68;A61K38/48;A61P7/02;C12R1/645 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 | 代理人： | 缪利明 |
| 地址： | 201203上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 镰孢菌纤溶酶 及其 制备 方法 | ||
1.一种镰孢菌纤溶酶，其特征在于，所述镰孢菌纤溶酶来源于保藏号为CGMCC No. 2347的菊花茎内生真菌镰孢菌(Fusarium sp.)，所述镰孢菌纤溶酶的N-末端氨基酸残基 序列为：QASSGTPATIRVLVV，分子量为28,000Da，等电点为8.1，所述镰孢菌纤溶酶的纤 溶作用可被苯甲基磺酰氟、乙二胺四乙酸抑制。
2.一种如权利要求1所述镰孢菌纤溶酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
A)将权利要求1中所述菊花茎内生真菌镰孢菌进行发酵培养；
B)从发酵液中分离纯化得到镰孢菌纤溶酶；
其中，所述步骤B)包括以下步骤：
C)发酵液中加入硫酸铵分级盐析，离心收集沉淀；
D)溶解沉淀，经微滤收取透出液，再经超滤膜超滤，收取截留液；
E)截留液以Sephadex G-25柱层析或透析法脱盐；
F)以MonoQ阴离子层析，用NaCl洗脱，收集活性峰的洗脱液，洗脱液经G-25柱 层析脱盐后冷冻干燥，得到镰孢菌纤溶酶的粗酶；
G)所得的镰孢菌纤溶酶粗酶经Superdex 75凝胶层析，收集活性峰，冻干后得到电 泳纯的镰孢菌纤溶酶。
3.如权利要求1所述镰孢菌纤溶酶在制备溶栓药物中的应用。
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