[发明专利]用于筛选药物的报告基因细胞模型及其构建方法

权利要求书

1.一种构建物，其特征在于，所述构建物从5’端到3’端依次含有式I所示的结构：

A-B-C      (式I)

其中，A为如SEQ ID NO：5中第2-82位所示的序列；

      B为巨细胞病毒启动子序列；

      C为报告基因序列。

2.如权利要求1所述的构建物，其特征在于，所述的构建物从5’端到3’端依次含有式II所示的结构：

A-B-C-D    (式II)

其中，D为Zeocin抗性基因序列。

3.如权利要求1所述的构建物，其特征在于，所述的报告基因选自：绿色荧光蛋白基因，和/或荧光素酶基因。

4.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求1-3任一所述的构建物。

5.一种细胞，其特征在于，所述细胞具有蛋白激酶C信号通路；并且，所述细胞：

含有权利要求4所述的载体；或

其基因组中整合有权利要求1-3任一所述的构建物。

6.如权利要求5所述的细胞，其特征在于，所述的细胞选自：CHO细胞，HEK-293细胞或Hela细胞。

7.如权利要求5所述的细胞，其特征在于，所述的细胞含有Gi/o偶联的G蛋白偶联受体或酪氨酸激酶受体。

8.权利要求5所述的细胞的用途，其特征在于，所述的细胞用于筛选调节蛋白激酶C信号通路的物质。

9.一种筛选调节蛋白激酶C信号通路的潜在物质的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)将候选物质给予权利要求5或6所述的细胞；和

(2)检测所述细胞中报告基因的表达情况；

其中，若所述候选物质可提高报告基因的表达，则表明该候选物质是激活蛋白激酶C信号通路的潜在物质；若所述候选物质可降低报告基因的表达，则表明该候选物质是抑制蛋白激酶C信号通路的潜在物质。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤(1)包括：在测试组中，将候选物质加入到权利要求5或6所述的细胞中；和/或

步骤(2)包括：检测测试组的体系中报告基因的表达，并与对照组比较，其中所述的对照组是不添加所述候选物质的权利要求5或6所述的细胞；

如果测试组中报告基因的表达在统计学上高于对照组，就表明该候选物是激活蛋白激酶C信号通路的潜在物质；如果测试组报告基因的表达在统计学上低于对照组，就表明该候选物是抑制激活蛋白激酶C信号通路的潜在物质。