[发明专利]泌尿生殖道支原体培养基及检测方法无效
申请号: | 200810035705.1 | 申请日: | 2008-04-08 |
公开(公告)号: | CN101555457A | 公开(公告)日: | 2009-10-14 |
发明(设计)人: | 顾伟鸣;吴磊;杨阳 | 申请(专利权)人: | 上海市皮肤病性病医院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12Q1/04;C12R1/01 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 20005*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 泌尿 生殖 支原体 培养基 检测 方法 | ||
1.泌尿生殖道支原体培养基及检测方法,其特征的组成是由液体和固体培养基组成,根据解脲脲原体(Uu)利人型支原体(Mh)生物学特性,优化了维持支原体生长的营养和环境、抑制杂菌生长抗生素组合,具体涉及培养基配方特征是含有胰酶大豆肉汤、酵母浸液、尿素、精氨酸、L-半胱氨酸、酚红、HEPES液、小牛(胎牛)血清、硫酸锰、万古霉素、两性霉素B、甲氧苄氨嘧啶、多粘菌素、青霉素等的要素和组合;具体涉及其液体培养基和固体培养基在培养、分离、鉴别泌尿生殖道支原体时组合使用,突出了培养基抑制杂菌能力,接种和转种样品不需要微孔滤器,支原体生长迅速;液体培养基具有维持和延长支原体生长对数期、指示生长;固体培养基观察Uu和Mh菌落,与背景反差大容易鉴别,其特征是避免了其他生物利用液体培养基中营养的微生物而引起的假阳性或假阴性,显著提高了泌尿生殖道支原体检测的敏感性和特异性。
(1)泌尿生殖道支原体培养基及检测方法,其特征是培养基的要素和组合包括:
A:液体培养基每1000ml液体组成:
1.胰酶大豆肉汤 5~10g
2.NaCl 3~7g
3.磷酸二氢钾 0.02~0.5g
4.酵母浸液 5~20g
5.尿素 1~5g
6.精氨酸 0.1~1g
7.L-半胱氨酸 20~50mg
8.HEPES 0.01~1g
9.酚红 5~30mg
10.万古霉素 0.1~5mg
11.两性霉素B 10~50μl
12.甲氧苄氨嘧啶 0.1~5mg
13.多粘菌素 0.3~6mg
14.小牛血清 100ml
15.蒸馏水 至1000ml
B:固体培养基每1000ml体积组成:
1.胰酶大豆肉汤 10~50g
2.硫酸锰 0.01~0.03g
3.琼脂 11g
4.蒸馏水 500ml
5.小牛血清 200ml
6.酵母浸液 1~3g
7.尿素 0.1~0.5g
8.精氨酸 0.1~0.5g
9.L-半胱氨酸 20~30mg
10.青霉素(钾盐)G 10万U/ml 0.01~0.02g
11.两性霉素B 10~20μl
12.蒸馏水 至1000ml
(2)泌尿生殖道支原体培养基及检测方法,其检测方法的特征是液体培养基和固体培养基在培养、分离、鉴别泌尿生殖道支原体时组合使用。
2.按照权利要求1所述的泌尿生殖道支原体培养基及检测方法,其特征是每1000ml液体和固体培养基中胰酶大豆肉汤干粉分别是5~10g和10~50g。
3.按照权利要求1所述的泌尿生殖道支原体培养基及检测方法,其特征是每1000ml液体和固体培养基中L-半胱氨酸含量分别是20~50mg和20~30mg。
4.按照权利要求1所述的泌尿生殖道支原体培养基及检测方法,其特征是每1000ml液体培养基中HEPES液5~30mg。
5.按照权利要求1所述的泌尿生殖道支原体培养基及检测方法,其特征是每1000ml液体和固体培养基中两性霉素B含量分别是10~50μl和10~20μl。
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