[发明专利]内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法

权利要求书

1、一种内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法，其特征在于，包括下列步骤：

第一步，制备仿生亲和分离材料

首先用三氯三氮嗪活化的基础层析介质与对氨基苯磺酸反应得到胺对苯磺酸一氯三氮嗪-介质，再与L-色氨酸反应，得到胺对苯磺酸-L色氨酸三氮嗪-介质，即仿生亲和分离材料；

第二步，用仿生亲和分离材料纯化内切木聚糖酶

将内切木聚糖酶粗品调节pH至上样条件，上样至用结合缓冲液预平衡的装有仿生亲和分离材料的层析柱中，清洗去除未结合杂质组分，再用洗脱缓冲液从柱中洗脱内切木聚糖酶，获得内切木聚糖酶纯品。

2、根据权利要求1所述的内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法，其特征是，所述反应得到胺对苯磺酸一氯三氮嗪-介质，其反应温度为50℃。

3、根据权利要求1或2所述的内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法，其特征是，所述再与L-色氨酸反应，其反应温度为95℃。

4、根据权利要求1所述的内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法，其特征是，所述基础层析介质是葡聚糖凝胶、交联的葡聚糖珠、烯丙基葡聚糖-N，N’-亚甲基双丙烯酰胺的交联共聚分离材料、甲基丙烯酸聚合分离材料、琼脂糖凝胶、交联琼脂糖凝胶，琼脂糖与葡聚糖的交联共聚物、聚丙烯酰胺-琼脂糖复合物珠、纤维素珠或涂有化学活性基团的硅胶中的一种。

5、根据权利要求1所述的内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法，其特征是，所述的仿生亲和分离材料，其配体结构含对胺基苯磺酸结构和L-色氨酸结构。

6、根据权利要求1所述的内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法，其特征是，第所述的结合缓冲液pH为5.0-10.0。

7、根据权利要求1所述的内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法，其特征是，所述的洗脱缓冲液pH为2.0-10.0。

8、根据权利要求1或7所述的内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法，其特征是，所述的洗脱缓冲液含NaCl浓度为0.0-1.0M。

9、根据权利要求1所述的内切木聚糖酶的仿生亲和纯化方法，其特征是，所述的内切木聚糖酶粗品，为天然微生物发酵，或通过基因工程技术改造的微生物发酵液，或菌体破碎液，包括Hypocrea jecorina发酵液。