[发明专利]一种毒隐翅虫素的鉴别方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种毒隐翅虫素的鉴别方法，具体说，是涉及一种利用液相色谱-质谱联用法鉴别毒隐翅虫素的方法。 

背景技术

毒隐翅虫是隐翅虫科中的一个属，已知种类超过250种，产自除南极洲以外的世界各地，中国已报道的毒隐翅虫有21种。毒隐翅虫主要生活在潮湿的农田、菜地、杂草丛中，是山沟、农田常见的小型昆虫。我国常见的毒隐翅虫有青翅蚁形隐翅虫(又称梭形毒隐翅虫、黄足蚁形隐翅虫)，黑足蚁形隐翅虫，多毛隐翅虫，巾形毒隐翅虫，小红毒隐翅虫，蚁态毒隐翅虫，西藏毒隐翅虫等7种，其中以青翅蚁形隐翅虫分布最广，遍及各省及台湾等地区。 

毒隐翅虫的卵、幼虫、蛹和成虫(除翅以外的各部分)都有毒素存在，成虫的毒素主要来源于血淋巴，雌、雄虫体内都含有毒素。毒隐翅虫的毒素是虫体用来抵御外来侵袭的化学物质。毒隐翅虫的毒液化学成分复杂，含有醛类、醌类、萜类等，有报道其毒素主要为3种，分别是毒隐翅虫素、拟毒隐翅虫素和毒隐翅虫酮。其中，毒隐翅虫素的含量最高，分子量为503.65，溶于有机溶剂乙醇、乙醚、氯仿及苯，不溶于水，结晶的毒隐翅虫素在112℃熔化，弱酸性，水中煮沸1h不被破坏。 

本发明人研究发现毒隐翅虫提取物具有促进糖尿病皮肤溃疡愈合、抑制HL-60人白血病细胞株生长、抑制BEL-7402人肝癌细胞株生长及促进毛发生长的药用功效，在医学上具有广泛的应用前景，可望用于制备治疗糖尿病皮肤顽固性溃疡、治疗某些类型的人白血病和人肝癌及促进毛发生长的药物制剂。但目前尚未有毒隐翅虫素的鉴别方法，使毒隐翅虫提取物在临床上的研究存在很大困难。 

发明内容

本发明的目的是提供一种毒隐翅虫素的鉴别方法，为毒隐翅虫提取物在临床上的研究提供便捷。 

为解决上述技术问题，本发明的技术方案如下： 

本发明的毒隐翅虫素的鉴别方法，包括样品处理及数据获取过程，其特征在于，具体过程如下： 

1)样品处理 

将毒隐翅虫提取物以50％HPLC级甲醇稀释100倍； 

2)数据获取 

首先利用液相色谱-质谱联用仪在负离子模式和正离子模式下分别扫描毒隐翅虫提取物稀释液，所述液相色谱条件为：色谱柱是Shiseido C18/100×2.1mm/5u、流动相是体积比为70∶30的甲醇一水及含1mM甲酸铵的溶液体系、流速是0.2ml·min^-1、柱温是30℃、进样量为10μl；所述质谱条件为：Turbo Ionspray离子源、三重四极杆质量检测器、喷雾气13L/min、气帘气12L/min、喷雾电压5KV、聚焦电压400V、入口电压10V、出口电压10V、辅助加热器温度450℃及扫描质量范围为400～800amu；获取母离子峰数据：色谱峰保留时间t_R＝4.0min，准分子离子峰[M-H]^-为m/z＝502.4，与甲酸根的加合离子峰[M+HCOO]^-为m/z＝548.4，与钠离子的加合离子峰[M+Na]⁺为m/z＝526.4； 

然后采用微量进样泵柱后注射方式进行碰撞诱导解离和扫描，获取子离子峰数据：m/z 470、m/z 438，m/z 502.2、m/z 470、m/z 438，m/z 494.2、m/z462.2、m/z 340。 

本发明提供的毒隐翅虫素的鉴别方法，由于采用了液相色谱-质谱联用系统，使得该鉴别方法具有优良的灵敏度，鉴别结果准确、有效及可靠，且操作方便，为毒隐翅虫提取物在临床上的研究提供了方便。 

附图说明

图1为毒隐翅虫提取物稀释液在负离子模式下扫描的0～8min色谱图； 

图2为毒隐翅虫提取物稀释液在正离子模式下扫描的0～8min色谱图； 

图3为母离子峰(t_R＝4.0min)在负离子模式下的质谱图； 

图4为母离子峰(t_R＝4.0min)在正离子模式下的质谱图； 

图5为m/z＝526.4离子的子离子质谱图； 

图6为m/z＝548.4离子的子离子质谱图； 

图7为m/z＝502.2离子的子离子质谱图； 

图8为毒隐翅虫素化合物的化学分子结构式。 

具体实施方式

下面通过实施例对本发明作进一步说明，其目的仅在于更好理解本发明的内容而非限制本发明的保护范围。 

实施例 

1、样品处理