[发明专利]重组极端耐热α-淀粉酶的复性与纯化方法有效
| 申请号： | 200810039429.6 | 申请日： | 2008-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN101613681A | 公开（公告）日： | 2009-12-30 |
| 发明（设计）人： | 张毅;王丽萨;陆坚峰;杨胜利 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N9/28 | 分类号： | C12N9/28 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 范 征 |
| 地址： | 20003*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 极端 耐热 淀粉酶 复性 纯化 方法 | ||
1.一种从嗜热α-淀粉酶的包涵体制备嗜热α-淀粉酶的方法，其特征在于，步骤为：
(1)用去垢剂溶液溶解嗜热α-淀粉酶的包涵体，从而获得含嗜热α-淀粉酶的溶液；所述的去垢剂溶液由按照重量体积比0.01-10%的去垢剂和缓冲溶液构成；所述的去垢剂是离子型去垢剂；和
(2)从(1)获得的溶液中分离出所述的嗜热α-淀粉酶。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的嗜热α-淀粉酶选自：火球菌属的嗜热α-淀粉酶、嗜热古菌的嗜热α-淀粉酶、沃氏火球菌的嗜热α-淀粉酶或来源于其他嗜热微生物的嗜热α-淀粉酶。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，
所述的去垢剂选自：十二烷基磺酸钠或十二烷基肌氨酸钠。
4.如权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，所述的去垢剂溶液中去垢剂的浓度按照重量体积比是0.02-5%。
5.如权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于，所述的去垢剂溶液的pH值是2.5-10.0。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，采用疏水层析法从含嗜热α-淀粉酶的溶液中分离嗜热α-淀粉酶。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，采用Phenyl Sepharose 6 Fast Flow疏水层析柱进行疏水层析；用乙二醇梯度洗脱。
8.一种去垢剂溶液的用途，其特征在于，用于溶解嗜热α-淀粉酶的包涵体，获得酶活力不变或增强的嗜热α-淀粉酶；所述的去垢剂溶液由按照重量体积比0.01-10%的去垢剂和缓冲溶液构成；所述的去垢剂是离子型去垢剂。
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