[发明专利]一种提高肽段离子化效率的方法无效

专利信息
申请号: 200810039698.2 申请日: 2008-06-26
公开(公告)号: CN101363779A 公开(公告)日: 2009-02-11
发明(设计)人: 许亚伟;张莉娟;陆豪杰;杨芃原 申请(专利权)人: 复旦大学
主分类号: G01N1/28 分类号: G01N1/28;G01N27/64
代理公司: 上海正旦专利代理有限公司 代理人: 吴桂琴
地址: 20043*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 提高 离子化 效率 方法
【权利要求书】:

1.一种提高肽段离子化效率的方法,其特征是通过下述方法和步骤:

1)采用碱性和疏水性有机化合物、肽键缩合试剂和催化剂分别溶解于有机溶剂中,上述三种试剂按照顺序依次加入多肽或蛋白质水溶液中形成反应体系,用酸调节pH值至7.5~7.8,室温下混悬,

所述的碱性和疏水性有机化合物选自2-肼基嘧啶,1-(2-嘧啶基)哌嗪,4-氨基-2-(1-哌嗪基)嘧啶或4-氨基-6-氯嘧啶;

所述的催化剂选自1-羟基苯并三唑、6-氯-1-羟基苯并三唑或1-羟基-7-氮杂苯并三唑;

2)去除上述反应体系中的溶剂,终止衍生反应,得产物;

3)将上述产物溶解,直接用于MALDI-MS或ESI-MS检测。

2.按权利要求1所述的提高肽段离子化效率的方法,其特征是所述的多肽或蛋白质的羧基包括碳末端羧基和酸性氨基酸侧链羧基。

3.按权利要求1所述的提高肽段离子化效率的方法,其特征是所述的肽键缩合试剂选自N,N-二环己基碳二亚胺、N,N-二异丙基碳、二亚胺1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐或碳酰二咪唑。

4.按权利要求1所述的提高肽段离子化效率的方法,其特征是所述的酸选自三氟乙酸、盐酸、甲酸或乙酸。

5.按权利要求1所述的提高肽段离子化效率的方法,其特征是所述的步骤2)的去除反应体系中的溶剂的方法是室温自然干燥、烘干、真空干燥或氮气吹干方式。

6.按权利要求1所述的提高肽段离子化效率的方法,其特征是所述的步骤3)中直接将产物用含5%乙腈0.1%甲酸的水溶液溶解用于电喷雾离子源质谱检测,或直接将产物用含50%乙腈0.1%三氟乙酸的水溶液溶解用于基质辅助激光解吸离子源质谱检测。

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