[发明专利]萘双加氧酶植物表达载体及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种萘双加氧酶植物表达载体，其特征在于，在pYPX245植物表达载体的BamHI和SacI酶切位点之间插入NahA融合基因编码序列；

所述的NahA融合基因为口蹄疫病毒2A蛋白与萘双加氧酶四个亚基以NahAa-2A蛋白-NahAb-2A蛋白-NahAc-2A蛋白-NahAd的串联方式而成；

所述的萘双加氧酶四个亚基的核苷酸序列分别为：

萘双加氧酶a亚基NahAa的核苷酸序列如SEQ.ID No.1所示：

5′ATGGAATTGTTGATTCAACCAAACAATCGCTTGATTTCTTTTAGTCCAGGTGCCAACTTGTTGGAAGTTTTG

CGTGAAAATGGTGTTGCTATTTCTTACTCTGGTATGTCTGGTCGTTGCGGTACTTGCCGTTGTCGTGTTACT

GATGGTCTGGTAATTGATTCTGGTGCTGGATCTGGTTTGCCAAACTTGGTAGATGAGCATTATGTTTTGGCT

TGTCAATCTGTTTTGACTCATAATTGTGCTATCGAAATCCCAGAAACTGATGAAATCGTTACTCATCCAGCT

CGTATCATCAAGGGTACTGTTGTTGCTGTTGAGTCTCCAACTCATGATATCCGTCGTTTGCGTGTACGTTTG

GCTAAGCCATTCGAGTTCTCTCCAGGTCAATATGCTACATTGCAGTTCTCTCCAGAGCATGCTCGTCCGTAT

TCAATGGCTGGTTTGCCAGATGATCAAGAAATGGAGTTCCACATACGCAAGGTTCCAGGTGGTCGTGTAACT

GAGTATGTTTTCGAGCATGTTCGTGAAGGTACTTCTATCAAGTTGTCTGGTCCATTGGGTACGGCTTATTTG

CGTCAGAACCATACCGGTCCAATGTTGTGTGTTGGTGGTGGGACTGGTTTGGCTCCAGTGTTGTCGATTGTT

CGTGGTGCTTTGAAGTTGGGTATGACAAACCCCATCTTGTTGTATTTCGGTGTTCGCTCTCAGCAAGATTTG

TACGATGCTGAGCGTTTGCATAAATTGGCTGCTGATCATCCACAACTGACTGTTCATACTGTTATTGCTATG

GGTCCAATTAATGAGTCTCAACGTGCTGGTTTGGTTACTGATGTTATCGAAAAAGACATCATTTCTTTGGCT

GGGTGGCGTGCTTACTTGTGTGGTGCACCAGCAATGGTTGAAGCGTTGTGCACCGTTACCAAGCATCTTGGA

ATATCTCCAGAACATATTTATGCCGATGCCTTCTATCCTGGTGGAATCTGA 3′

萘双加氧酶b亚基NahAb的核苷酸序列如SEQ.ID No.2所示：

5′ATGACTGAAAAATGGATTGAAGCAGTTGCTTTGTCTGATATCCCAGAAGGTGATGTTTTGGGTGTAACTGTA

GAGGGCAAGGAGTTGGCTTTGTACGAAGTGGAAGGTGAAATCTACGCTACCGACAACTTGTGCACGCATGGT

GCTGCTCGCATGTCTGATGGTTATTTGGAGGGTCGAGAAATCGAATGCCCATTGCATCAAGGTCGTTTTGAC

GTTTGTACAGGCAGAGCCTTGTGTGCTCCAGTGACAGAGAACATCAAAACATATGCAGTCAAGATTGAGAAC

TTGCGTGTAATGATTGATTTGTCTGGTGAGTTTTAA 3′

萘双加氧酶c亚基NahAc的核苷酸序列如SEQ.ID No.3所示：

5′ATGAACTACAAGAACAAGATCTTGGTATCTGAATCTGGTTTGACTCAAAAGCACTTGATTCATGGTGATGAA

GAATTGTTCCAGCACGAATTGAGAACTATCTTCGCTCGTAACTGGTTGTTCTTGACTCATGATTCTTTGATT

CCATCTCCAGGTGATTATGTTACCGCAAAGATGGGTATCGACGAGGTAATCGTTTCTCGTCAGTCTGATGGT

TCGATTCGTGCATTCTTGAACGTTTGTCGTCACCGTGGTAAGACGTTGGTTAACGCTGAAGCTGGTAACGCA

AAGGGTTTCGTTTGCTCTTACCATGGTTGGGGTTTCGGTTCCAATGGTGAGTTGCAGTCTGTTCCATTCGAG

AAGGAGTTGTACGGTGAGTCTTTGAACAAGAAGTGTTTGGGTTTGAAGGAAGTTGCTCGTGTTGAGTCTTTC

CATGGTTTCATCTATGGTTGCTTCGATCAGGAGGCTCCACCATTGATGGATTACTTGGGTGATGCTGCTTGG

TACTTGGAGCCAATCTTCAAGCATTCTGGTGGTTTGGAACTGGTCGGTCCACCAGGCAAGGTTGTTATCAAG

GCTAACTGGAAGGCACCAGCTGAAAACTTCGTGGGTGATGCATACCACGTGGGTTGGACGCACGCGTCTTCT

TTGCGTTCTGGAGAGTCTATCTTCGCTTCTTTGGCTGGTAACGCTGTTCTGCCACCAGAAGGTGCAGGTTTG

CAAATGACTTCCAAGTATGGTTCTGGCATGGGTGTGTTGTGGGATGGTTACTCTGGTGTTCATTCTGCAGAT

TTGGTTCCAGAGTTGATGGCATTCGGTGGTTCTAAGCAGGAGAGGTTGAACAAGGAGATCGGTGATGTTCGT

GCTCGTATCTATCGTTCTCACCTCAACTGCACCGTTTTCCCAAACAACTCTATGTTGACCTGCTCTGGTGTT

TTCAAGGTATGGAACCCAATCGATGCAAACACTACCGAGGTCTGGACCTACGCAATCGTTGAGAAGGATATG

CCAGAGGATTTGAAGCGTCGTTTGGCAGATTCTGTACAGCGTACGTTCGGTCCAGCTGGTTTCTGGGAGTCT

GATGACAACGACAACATGGAGACTGCTTCTCAAAACGGCAAGAAGTACCAATCTCGTGATTCTGATTTGTTG

TCAAACTTGGGTTTCGGTAAGGATGTATACGGTGATGCTGTTTACCCAGGTGTTGTTGGTAAGTCTGCAATC

GGTGAGACTTCTTATCGTGGTTTCTATCGTGCTTACCAGGCTCACGTTTCTTCTTCCAACTGGGCTGAGTTC

GAGGATGCTTCTTCTACTTGGCATACTGAGTTGACGAAGACTACTGATCGTTAA 3′

萘双加氧酶d亚基NahAd的核苷酸序列如SEQ.ID No.4所示：

5′ATGATGATCAACATCCAAGAAGACAAGCTGGTCTCTGCTCACGATGCTCAAGAGTTCTTGCGTTTCTTCAAT

TGCCACGACGCTGCTTTGCAACAAGAAGCTACCACGCTGCTGAACCGGGAAGCGCATTTGTTGGACATTCAG

GCTTACCGTGCTTGGTTGGAGCACTGCGTTGGTTCTGAGGTTCAATACCAGGTCATTTCACGCGAACTGCGT

GCTGCTTCTGAGCGTCGTTACAAGTTGAATGAAGCCATGAACGTTTACAACGAGAACTTTCAGCAATTGAAA

GTTCGTATCGAGCATCAACTTGATCCACAAAACTGGTCTAACTCTCCAAAGTTGCGTTTCACTCGTTTCATC

ACCAATGTCCAGGCTGCACGTGATGTAGATGACGAAGAGTTGTTGCACATCCGCTCTAACGTCATCTTGCAC

CGTGCACGTCGTGGCAATCAGGTAGATGTATTCTACGCTGCTCGTGAAGACAAGTGGAAACGTGGTGAAGGT

GGTGTTCGAAAGTTGGTCCAGCGATTCGTGGATTACCCAGAGCGTATATTGCAGACGCACAACTTGATGGTC

TTCTTGTGA 3’；

所述的口蹄疫病毒2A蛋白基因序列如SEQ.ID No.5所示：

CTGTTGAATTTCGATCTTCTTAAGCTTG CTGGTGATGTTGAATCCAACCCAGGTCCA。