[发明专利]抑制端粒酶活性的融合蛋白、其制备及应用

权利要求书

1.一种分离的融合蛋白，其特征在于，所述的融合蛋白包括：

(1)端粒酶活性抑制蛋白LPTS；

(2)反式激活蛋白TAT；和

(3)位于(1)和(2)之间的由0-20个氨基酸构成的连接肽；

其中，所述的端粒酶活性抑制蛋白LPTS是：

(a)SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列的蛋白；或

(b)SEQ ID NO:2中第16-211位所示氨基酸序列的蛋白；

所述的反式激活蛋白TAT是具有SEQ ID NO:2中第2-12位所示氨基酸序 列的蛋白；

所述反式激活蛋白TAT位于融合蛋白的氨基端；所述端粒酶活性抑制蛋 白LPTS位于融合蛋白的羧基端。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述连接肽是0-10个氨 基酸构成的连接肽。

3.如权利要求2所述的融合蛋白，其特征在于，所述连接肽是1-4个氨基 酸构成的连接肽。

4.如权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID NO: 2所示。

5.一种核酸分子，其特征在于，所述的核酸分子编码权利要求1-4任一所 述的融合蛋白。

6.一种载体，其特征在于，它含有权利要求5所述的核酸分子。

7.一种基因工程化的细胞，其特征在于，

所述的细胞含有权利要求6所述的载体；或

所述的细胞基因组中整合有权利要求5所述的核酸分子。

8.一种产生权利要求1所述的融合蛋白的方法，其特征在于，所述的方法 包括：在适合表达所述融合蛋白的条件下，培养权利要求7所述的细胞，表达 和分离出所述的融合蛋白。

9.权利要求1-4任一所述的融合蛋白的用途，其特征在于，用于制备抑制 端粒酶阳性细胞生长的组合物。

10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述的细胞是端粒酶阳性的 肿瘤细胞。

11.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述的端粒酶阳性细胞包括： 肝癌BEL-7404细胞，肝癌HepG2细胞。

12.一种抑制肿瘤的组合物，其特征在于，所述的组合物含有：

(i)有效量的权利要求1-4任一所述的融合蛋白；和

(ii)药学上可接受的载体。

13.一种将端粒酶活性抑制蛋白LPTS导入细胞的方法，其特征在于，所 述方法包括以下步骤：

(a)将反式激活蛋白TAT与端粒酶活性抑制蛋白LPTS融合，获得融合蛋 白；

(b)将(a)的融合蛋白与细胞共孵育，从而端粒酶活性抑制蛋白LPTS被导 入细胞内；

其中，所述的端粒酶活性抑制蛋白LPTS是：

(a)SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列的蛋白；或

(b)SEQ ID NO:2中第16-211位所示氨基酸序列的蛋白；

所述的反式激活蛋白TAT是具有SEQ ID NO:2中第2-12位所示氨基酸序 列的蛋白；

所述反式激活蛋白TAT位于融合蛋白的氨基端；所述端粒酶活性抑制蛋 白LPTS位于融合蛋白的羧基端。