[发明专利]规模化培育北冬虫夏草的培养基的熟化及灭菌方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种培养基的熟化及灭菌方法，特别涉及一种北冬虫夏草(Cordyceps Militaris)培养基的熟化及灭菌方法。 

背景技术

工厂化大规模生产北冬虫夏草需要大量的培养基。组织培养北冬虫夏草的培养基主要由大米、黄豆粉、各类蛋白质和有机物质所配伍组成。组织培养北冬虫夏草的培养基极易变质和发霉发酵，因此其必须经过熟化处理和高温加压灭菌后，在无菌的状态下，才能进入到接种的工序。培养基的熟化和灭菌成了大规模工厂化培育北冬虫夏草的关键技术。 

目前在国内外培育北冬虫夏草，由于普遍是小规模的试产，且无质量标准，更无大规模工厂化生产(即年产20吨以上北冬虫夏草)的成熟经验，所以生产过程中较多采用卧式圆形蒸汽灭菌锅进行熟化与灭菌。这种生产方式完全不能满足大规模工厂化生产北冬虫夏草的要求，年产量至多只能达到5吨左右。有些科研院所和生产单位，无大规模生产技术和生产条件，采用了蒸汽熟化和高压灭菌分步的生产方法，达不到培养基彻底熟化和灭菌的要求，在物料转送和接种过程中更易染菌，往往会造成大批量的霉变。 

发明内容

本发明的目的在于提出一种规模化培育北冬虫夏草的培养基的熟化及灭菌方法，以解决现在的熟化和灭菌方法无法大容量处理培养基的问题，以及培养基在熟化和灭菌过程中容易染菌，造成大批量的霉变的问题。 

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案： 

规模化培育北冬虫夏草的培养基的熟化及灭菌方法，其特征在于：熟化步骤和灭菌步骤合并进行，熟化和灭菌的温度为100℃～135℃，熟化和灭菌的保温时间为40min～50min。 

进一步，所述熟化和灭菌在有前后两门的双开门隧道式压力蒸汽灭菌器中同步进行；所述双开门隧道式压力蒸汽灭菌器是前门进料时后门自行锁闭、后门出料时前门自行锁闭的双开门隧道式压力蒸汽灭菌器。 

本发明所述方法中的双开门隧道式压力蒸汽灭菌器，最大的特点是前门进料时后门自行锁闭，后门出料时前门自行锁闭，避免了物料熟化灭菌后，二门同时开启，形成空气流通，造成交叉污染。灭菌器是由上海华线医用核子仪器有限公司提供的SVW105型卧式压力蒸汽灭菌器，可在其内部运用现有技术中的机械联锁原理，使其达到一门开启，另一门自行锁闭的结果。 

进一步，熟化和灭菌后，将培养基送进与所述双开门隧道式压力蒸汽灭菌器的后门紧接的、具有10万级净化洁净控制标准的缓冲间。 

本发明所述的双开门隧道式压力蒸汽灭菌器进行出料的后门紧接具有10万级净化洁净控制标准(具体标准见下表)的缓冲间，这样能严格保证经熟化灭菌后的物料在出料后，能在洁净控制级别标准内进入到强冷室和无菌接种室。本发明所述的双开门隧道式压力蒸汽灭菌器的温度和压力调控，全部由电脑设定的操作程序和控制标准执行，灵敏度高，计时计压精确，自动化程度高，且灭菌器的容量完全可以依照工厂化的规模来设定。而现有的双开门压力灭菌器，双门可同时开启，出料门无净化标准控制，容量小，能耗高，易污染。 

又进一步，所述的规模化培育北冬虫夏草的培养基的熟化及灭菌方法，其特征在于，包括以下步骤： 

a)、加水步骤——向所述双开门隧道式压力蒸汽灭菌器内加入熟化和灭菌所需量的水； 

b)、预热步骤——将步骤a)中所加的水预热至100℃～135℃； 

c)、产品摆放步骤——将装有需熟化和灭菌的培养基的培养盒，摆放在搬运车上后，从前门推进所述双开门隧道式压力蒸汽灭菌器的灭菌室内并关门密闭； 

d)、加热步骤——待所述双开门隧道式压力蒸汽灭菌器的套层压力升至0.10Mpa后，使所述双开门隧道式压力蒸汽灭菌器的灭菌室升温且增压，直至套层压力和灭菌室压力相当，稳定于0.11Mpa； 

e)、熟化和灭菌步骤——待所述双开门隧道式压力蒸汽灭菌器的灭菌室的温度升至100℃～135℃以后，进入熟化和灭菌保温状态，进行熟化和灭菌，熟化和灭菌保温时间为40min～50min分钟； 

f)、排气步骤——排除灭菌室内的气体，待灭菌室温度自然降低到90℃以下、压力降为零后，在环境净化控制在10万级的缓冲间内开启所述双开门隧道式压力蒸汽灭菌器的后门，从所述双开门隧道式压力蒸汽灭菌器的后门送出搬运车。 

与现有技术相比较，本发明所述的规模化培育北冬虫夏草的培养基的熟化及灭菌方法具有以下有益效果：