[发明专利]三分类全血质控物模拟物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种三分类全血质控物模拟物及其制备方法。

背景技术

全血质控物是临床检验领域用于实验内和实验室间质量评价的重要试剂之一，国外质控物性能稳定，目前国内相关产品主要依靠进口，通过对国内外相关文献和专利检索，国外主要采用鸟类有核红细胞、胶乳、花粉、微生物颗粒和蹄科动物红细胞或裸核等模拟白细胞和血小板，采用人血红细胞模拟质控物的红细胞。由于国内对血源的特殊政策，血源问题急待解决。由于地域不同，相同物种的血液学特性有所偏差，就地取材将节约巨大的成本，而且现有质控物也存在一些缺陷，猪血小板模拟人血小板制备困难，容易聚集；羊红细胞固定后添加容易出现假白细胞干扰；人红细胞在加工处理过程遭受一定的打击，效期不长。本着来源易获，快捷价廉，效果优良的原则，寻找一条更加优化的制备方案迫在眉睫。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种三分类全血质控物模拟物及其制备方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是：三分类全血质控物模拟物的制备方法，该方法包括红细胞模拟物的制备、白细胞和血小板模拟物的制备：(1)、红细胞模拟物的制备：a、收集家畜或浆站废弃血并采用抗凝剂处理，所述抗凝剂组分为：EDTA-Na₂ 50～150g/L，柠檬酸钠20～40g/L，抗凝剂按上述组分配制后高压消毒灭菌，体积比按抗凝剂∶血＝1∶10～20进行抗凝处理；b、采用洗涤液洗涤步骤a处理后的家畜或浆站废弃血，通过离心法去除血浆和白细胞层制备红细胞，所制备红细胞的纯度为99～100％；c、将步骤b制备的红细胞采用半固定液半固定后用红细胞保存液保存即为红细胞模拟物；(2)白细胞和血小板模拟物的制备：d、抽取鱼类的血并采用抗凝剂处理，所述抗凝剂组分为：EDTA-Na₂ 50～150g/L，柠檬酸钠20～40g/L，抗凝剂按上述组分配制后高压消毒灭菌，体积比按抗凝剂∶血＝1∶10～20进行抗凝处理；e、将步骤d抽取的鱼类血液与洗涤液混合离心洗涤去除血浆；f、将步骤e洗涤后的血液置入固定液中固定；g、将步骤f固定后血液体置于红细胞保存液中保存即为白细胞和血小板模拟物；h、将红细胞模拟物、白细胞和血小板模拟物分别混悬于细胞悬液中调节其浓度作单项质控物使用，或将红细胞模拟物、白细胞和血小板模拟物组合混悬于细胞悬液中调节其浓度作全血质控物使用。

本发明用鱼类血液模拟人白细胞和血小板，家畜红细胞和浆站废弃血红细胞模拟人血红细胞，模拟人血样本实际的直方图分布，采用本发明的细胞悬液配方保存期限更长，在实验过程中发现采用鲢鱼、草鱼、鲤鱼、鳄鱼等红细胞都可进行模拟操作，通过固定剂处理可达到良好的质控效果；该方法抗凝剂的高压消毒灭菌按照常规试验的高压消毒灭菌即可。

步骤a所述家畜血和步骤d所述鱼类血是通过心脏穿刺取得的新鲜血液，步骤a所述浆站废弃血是浆站采浆后废弃管道内的新鲜血。

步骤b所述洗涤液是渗透压为0～1000mOsm/kg的枸橼酸缓冲液，该枸橼酸缓冲液的成份为(/L)：枸橼酸0.1～1g/L，枸橼酸钠0.3～3g/L，磷酸二氢钠0.1～3g/L，氯化钠0.3～20g/L；所述步骤b采用上述成分配制枸橼酸缓冲液，调节PH为6.0～8.0，高压消毒灭菌，按血∶枸橼酸缓冲＝1∶3～20的体积配比，离心洗涤。

步骤b所述红细胞纯度为99.97～100％。

步骤c所述半固定液是含醛类、醇类的复合物，该复合物成分为：醛类终浓度为0.001～0.03％，醇类终浓度为0.005～0.1％，土温-20或土温-80，终浓度为0.001％～0.05％；所述醛类选自戊二醛、甲醛、多聚甲醛的一种或多种，醇类选自乙醇、山梨醇的一种或多种。

步骤c所述红细胞保养液的渗透压为200～400mOsm/kg，其成份为(/L)：枸橼酸0.1～1g/L，枸橼酸钠0.3～3g/L，磷酸二氢钠0.1～3g/L，氯化钠0.3～20g/L，葡萄糖2.0～10g/L，腺嘌呤0.3～1g/L，甘露醇10.0～20.0g/L，庆大霉素100～1000×，青霉素100～1000×；红细胞保养液按上述成分配制红细胞保养液，过滤灭菌。

步骤f所述固定液是醛类的复合物，其终浓度为0.1～1.0％，醛类选自戊二醛、甲醛、多聚甲醛的一种或多种。