[发明专利]微小隐孢子虫双价核酸疫苗及制备方法

权利要求书

1.一种微小隐孢子虫双价核酸疫苗，其特征在于：以真核表达载体pVAX1为载体，将两个微小隐孢子虫保护性抗原基因联合CpG免疫加强序列串联插入到pVAX1真核表达载体的多克隆位点区，获得含免疫加强序列的微小隐孢子虫双价核酸疫苗；所述的微小隐孢子虫保护性抗原基因为CP12和CP21；

CP12的序列：

Atgtcagatg catcaataga ttggaagttt tcaataggtt tctatgctgc gatatttgta 60

gctctactcc ctaccggcat ttcattgaca tactggtatg aaggagtact ttggcacaac 120

gtattcgaac aggataggct ccagtggcaa cctgaaagaa acgatgcgca aaattttacc 180

aatggtaatc aatataacta tattcaagtt ccaaccgatt ttaatagtgt gatgggaggg 240

ctacagtcgc cttcagaaat ggcaagaaca attgaaagga acatagaaaa gaaacagatg 300

aatgaacaaatatag 315；

CP21的序列：

atgtctaaaa gagcatcact atttattttt attttcttcg tattgtttga catttttgca 60

acttcacaac atgaggtttc cccaaagttg gctgtgagta gagctgaagc gttatctttt 120

gaaaacagcg aaataagttt gaaagaatta gcatctagac tcaagaccct tctttcagtg 180

gaacaaataa tatatcttgt tcggaaaata attccagaag actttcaatt ggttgctaaa 240

tccagcgaac atgattattt tgatgtgagt gaaagcacac ttaaagaaac ctatgaaaat 300

ataatttatc aaaacctaac taaagtacct atctatcagc tagttcatat accagaactt 360

ttatctaatg ccactcattt aaggaaaatt cgaaatgcta tcagttcccc aagaccagta 420

agacctagaa aacaaataaa agggaggaat ccaagtaata ttccaggcgc atccccttat 480

tttgtatacg agagagtaat agaaatatat aattctgatt ctgacgttca aacagatgaa 540

tag 543。

2.权利要求1所述微小隐孢子虫双价核酸疫苗的制备工艺，包括以下步骤：将CpG-CP12、CP21目的基因与T载体进行连接，分别用BamHI、EcoR1和EcoR1、Xhol进行双酶切反应，回收片段与经过BamHI和Xhol双酶切反应的真核表达载体pVAX1进行连接，构建pVAX1-CpG-CP12-CP21重组载体。