[发明专利]雄甾-1,4,6-三烯-3,17-二酮的制备方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种甾体结构的制备方法，尤其是涉及1，4，6-三烯结构甾体中间体的制备

背景技术：

雄甾-1，4，6-三烯-3，17-二酮是一种重要的甾体中间体，可以利用其制备1α-羟基去氢表雄酮(CAS：20998-18-9)等物质，文献HELVETICA CHIMICA ACTA-Vol.64，Fasc.6(1981)-Nr-180，1870～1873公开了雄甾-1，4，6-三烯-3，17-二酮用于合成1α-羟基去氢表雄酮的用途。文献J chem.Soc.1968，2568-2570和文献J org.chem.1974.Vol 392931-2933公开了1，4，6-三烯结构甾体中间体的主要合成路线为以去氢表雄酮(CAS：53-43-0)为原料，采用2，3-二氯-5，6-二氰基-1，4苯醌(DDQ)作为脱氢试剂一步制备而成，路线如下：

该路线存在不足为反应选择性较差，杂质较多，并且根据DDQ的MSDS文件中(http://www.sciencelab.com/xMSDS-2_3_Dichloro_5_6_dicyano_1_4_benzoquinone-9923726，p.4)公开，DDQ是一种皮肤接触、吸入、吞咽都非常危险的化学物质，更主要的是产生的副产物与产物的物理性质较为接近，工业上精制极为困难，且DDQ的经脱氢反应后转化为氯代苯酚类物质，在自然界中难于降解，对环境污染十分严重。并且现有技术采用的原料为去氢表雄酮，成本较高。而我公司下属天津天药药业股份有限公司开发的植物甾醇转化雄烯二酮新工艺，以植物油精炼副产品中提炼出的植物甾醇为原料，采用生物工程技术开发4-雄烯二酮(即化合物(I))生产新工艺，大幅度降低了4-雄烯二酮(I)的生产成本。因此，为拓宽4-雄烯二酮的应用领域，有必要开发出以4-雄烯二酮为原料的新的甾体激素合成路线。

发明内容：

针对现有技术的问题，为拓宽4-雄烯二酮的应用领域，我们设计了一条全新的雄甾-1，4，6-三烯-3，17-二酮合成路线如下：

所述的合成路线由以下反应步骤构成：

(1)3-位保护

将化合物(I)加入极性有机溶剂中，加入酯类试剂和酸催化剂得到化合物(II)。

(2)6，7位双键

将步骤(1)所得的化合物(II)加入到有机溶剂中，加入卤化试剂和水进行卤化反应，反应完成后，再加入锂盐反应得到化合物(III)。

(3)1，4，6-三烯的合成

将步骤(2)所得化合物(III)利用采用节杆菌进行生物发酵的方法进行1，2位脱氢，得到目标化合物。

所述步骤(1)中的极性有机溶剂包括但不仅限于低级脂肪醇中的一种或几种，如甲醇或乙醇；酮类中的一种或几种，如丙酮或甲乙酮；醚类中的一种或几种，如乙醚、四氢呋喃、二氧六环，优选乙醇、甲醇、丙酮、四氢呋喃中的一种或几种，最优选采用甲醇或乙醇。所用酯类试剂可选原甲酸三乙酯、乙酸异丙烯酯中的一种或几种，优选原甲酸三乙酯。酸催化剂优选对甲基苯磺酸(PTS)、吡啶溴氢酸盐、吡啶盐酸盐。反应温度为-10℃～60℃，优选-10～20℃，反应结束后，加弱碱中和处理。

在步骤(1)中，化合物(I)∶极性有机溶剂＝1∶1～10(重量体积比)，化合物(I)∶酯类试剂∶酸催化剂＝1∶1～3∶0.01～0.1(摩尔比)。

所述步骤(2)中选用的有机溶剂优选非质子溶剂，包括但不仅限于烷烃如正己烷、环己烷，醚类如乙醚、四氢呋喃、二氧六环，DMF(N，N-，二甲基甲酰胺)中的一种或几种；优选DMF或四氢呋喃。步骤(2)中卤化试剂选择溴化或氯化试剂，如二溴海因、二氯海因、溴代琥珀酰亚胺(NBS)、氯代琥珀酰亚胺(NCS)、优选NBS。选用的锂盐包括但不仅限于碳酸锂(Li₂CO₃)，氯化锂(LiCl)、溴化锂(LiBr)中的一种或几种，优选Li₂CO₃和LiBr的组合。卤化阶段反应温度选自-10℃到30℃，优选0～20℃，加入锂盐后反应温度选自0℃～120℃，优选60℃～100℃。

在步骤(2)中化合物(II)∶有机溶剂＝1∶1～10(重量体积比)，化合物(I)∶卤化试剂∶锂盐(以锂离子计)＝1∶1.2～2∶1.2～2(摩尔比)。

步骤(3)生物发酵中采用的菌种为节杆菌(拉丁命名：Arthrobacter sp.保藏编号：AS1.8中国科学院微生物研究所提供)，生物发酵工艺如下：