[发明专利]快速检测水溶液中半胱氨酸的方法

权利要求书

1.一种快速检测水溶液中半胱氨酸的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)、配制pH5.5-6.5浓度1-100mM的HEPES缓冲溶液，并配制2×10^-3M的Cu²⁺溶液、2×10^-3M的二甲酚橙溶液；

(2)、把2ml的HEPES缓冲溶液加到干净的紫外比色皿中，作为空白，用微量进样器吸取2×10^-3M的二甲酚橙溶液25μl，加到上述比色皿中，此时溶液由无色变黄，在紫外可见分光光度仪上检测，441nm有最大吸收；

(3)、在步骤(2)的比色皿中，加入与二甲酚橙等量的Cu²⁺溶液，此时溶液由黄变紫红，在紫外可见分光光度仪上检测，发现最大吸收峰由上述的441nm变为572nm；

(4)、取半胱氨酸水溶液，逐渐用微量进样器加到步骤(3)比色皿中，边加样边在紫外可见分光光度仪上检测，随着半胱氨酸水溶液的加入，最大吸收峰又由572nm逐渐向441nm变回，溶液的颜色也逐渐由紫红变回黄色，此时441nm吸收峰达到最大值，停止加半胱氨酸水溶液，此时加入半胱氨酸水溶液体积计为V_半胱氨酸μl；

(5)、按[Cu²⁺]×4×25μl/V_半胱氨酸μl计算出半胱氨酸的含量。

2.一种快速检测水溶液中半胱氨酸的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)、配制pH5.5-6.5浓度1-100mM的HEPES缓冲溶液，并配制2×10^-3M的Cu²⁺溶液、2×10^-3M的二甲酚橙溶液；

(2)、取干净的两个比色管，各加2ml的HEPES缓冲溶液，再用微量进样器各加入2×10^-3M的二甲酚橙溶液25μl，此时溶液由无色变黄，记为R₁、R₂；

(3)、在R₂中加入2×10^-3M的Cu²⁺溶液25μl，此时溶液由黄变紫红；

(4)、取半胱氨酸水溶液，逐渐用微量进样器加到R₂中，加至颜色与R₁相同，所加半胱氨酸水溶液体积计为V_半胱氨酸μl；

(5)、按[Cu²⁺]×4×25μl/V_半胱氨酸μl计算出半胱氨酸的含量。

3.一种快速检测水溶液中半胱氨酸的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)、配制pH5.5-6.5浓度1-100mM的HEPES缓冲溶液，并配制2×10^-3M的Cu²⁺溶液、2×10^-3M的二甲酚橙溶液；

(2)将25μl的Cu²⁺溶液与25μl的二甲酚橙溶液加入至2ml的HEPES缓冲溶液中，搅拌均匀后，此时溶液呈紫红色；

(3)将大块滤纸浸入步骤(2)的紫红色溶液中5-10秒，取出在空气中晾干，反复浸润1-3次，晾干后即成半胱氨酸试纸，将此试纸剪成条状备用；

(4)取步骤(3)条状试纸5条，分别浸润于浓度为0、0.01、0.04、0.08、0.1mM的半胱氨酸水溶液中2-5秒，取出，即得到依次呈紫色、紫红色、紫黄色、土黄色和金黄色的半胱氨酸试纸浓度梯度色阶图；

(5)取半胱氨酸试纸浸润于待测样中2-5秒取出，根据试纸颜色变化与半胱氨酸浓度梯度色阶图对比，判定待测样半胱氨酸的含量。

4.如权利要求3所述的快速检测水溶液中半胱氨酸的方法中制得的半胱氨酸试纸。

5.如权利要求3所述的快速检测水溶液中半胱氨酸的方法中制得的半胱氨酸试纸浓度梯度色阶图。

6.如权利要求1、2或3所述的快速检测水溶液中半胱氨酸的方法，其特征在于所述的Cu²⁺溶液是用可溶性二价铜盐配制而成。

7.如权利要求6所述的快速检测水溶液中半胱氨酸的方法，其特征在于所述的可溶性二价铜盐选自氯化铜、醋酸铜、硫酸铜、硝酸铜、高氯酸铜、葡萄糖酸铜。