[发明专利]具有毒杀松材线虫活性的化合物及其应用

权利要求书

1.一种具有毒杀松材线虫活性的化合物制备方法，由拟青霉菌 (Paecilomyces)，采用固体发酵及提取分离的方法得到化合物Cerebroside  A和Cerebroside B，其结构式为：

在化合物Cerebroside A中，结构式中的R为：

化合物Cerebroside B中，结构式中的R为：

具体制备方法为：

a)真菌拟青霉菌(Paecilomyces)的活化：

PDA培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15g，水1000mL，制 成试管斜面，挑取菌丝体接种于试管斜面上，25℃培养7天；

所述真菌拟青霉菌为2007年12月27日保藏在中国科学院微生物所， 保藏号为CGMCC No.2308的拟青霉菌；

b)真菌拟青霉菌(Paecilomyces)的固体发酵培养：

大米培养基制备过程为：将100g大米和100mL水加入500mL三角 瓶中，浸泡过夜，灭菌冷却待用；

将制备好的菌悬液5mL接种于大米培养基上，25℃培养40天；菌悬 液的孢子浓度为1×10⁶个/mL；

c)待发酵完毕，将乙酸乙酯加入三角瓶中提取三次，减压蒸干有机 溶剂，得到粗提物；

d)将粗提物用石油醚-乙酸乙酯-甲醇体系进行减压硅胶柱层析；

e)在活性跟踪指导下，将活性组分通过Sephdex-LH 20分离，将活性 馏份通过HPLC制备得到化合物Cerebroside A和Cerebroside B。