[发明专利]具有抗肿瘤作用的乌骨藤碳－21甾体皂苷混合物

说明书

技术领域

本发明属医药技术领域，具体涉及一种从中药乌骨藤(Marsdeniatenacissima)中提取分离得到的具有抗肿瘤作用的碳-21甾体苷混合物-乌骨藤总苷H和以该类化合物为活性成分的药物组合物，以及它们在抗肿瘤方面的应用。

背景技术

癌症是当今世界最大的疑难病症之一。大量的临床和实验研究证明，中医药在癌症的防治和康复方面具有重要的作用，从中草药中寻找抗癌活性成分，不仅对发现新药有很大潜力，而且可为设计更理想的新药提供独特的化学结构。

因此，很多国家和制药企业把抗癌药物开发的重点逐步转向天然药物。

乌骨藤，为萝藦科植物，具有清热解毒、化痰软坚之功效。以乌骨藤单味制成的制剂“消癌平片”和“消癌平注射液”临床用于治疗食道癌、胃癌、肺癌、肝癌，取得较好的疗效，但存在以下几个问题：(1)提取工艺有待改进“消癌平片”系乌骨藤水提取后加工制成的片剂，每日服用量24-30片。成分复杂，成品体积大，有效成分相对含量低，生物利用度低，服用量大；“消癌平注射液”系乌骨藤水提取浸膏，加聚山梨酯80加工制成的注射剂，以聚山梨酯80作增溶剂，毒副作用大。(2)质量控制技术落后“消癌平片”质量标准仅有理化鉴别项；“消癌平注射液”用分光光度法测定总酚酸的含量。(3)有效成分有待确证。乌骨藤中绿原酸等酚酸类成分仅为其抗炎有效成分，而其中的抗癌有效成分尚不明确。近年来，随着新的提取分离技术的产生，并应用于药物的生产中，同时政府十分重视提高中药产品的附加值和技术含量，从而提高药物的疗效。因此十分有必要对乌骨藤抗肿瘤作用有效成分进行进一步的研究与开发，阐明其中的有效成分或有效部位，这不仅对加快传统中药产业改造，实施中药现代化工程及促进医药产业发展有重要意义，而且对创制具有我国特色、拥有自主知识产权、并符合国际规范的新药有重要的指导意义。

发明内容

本发明的目的是通过现代化学和药理手段，从乌骨藤中提取分离出具有抗肿瘤作用的碳-21甾体苷混合物-乌骨藤总苷H。

本发明从乌骨藤中提取分离具有抗肿瘤作用的碳-21甾体苷类化合物，得到5种碳-21甾体苷，分别为：通光藤苷A，通光藤苷B，通光藤苷C，通光藤苷D，Marsdenoside K，以及包含这5种碳-21甾体苷的混合物-乌骨藤总苷H。该混合物中，一般地其碳-21甾体苷类化合物的重量含量≥80％。

乌骨藤总苷H的制备方法，该方法包括以下步骤：

a.将乌骨藤的茎粉碎后，以乙醇提取；

b.乙醇提取液浓缩后经硅胶柱层析，氯仿-乙醇进行梯度洗脱；

c.用薄层层析检测层析流分，具有相同单一斑点的流分合并浓缩，得到含上述碳-21甾体苷类化合物的流份即为乌骨藤总苷H。

本发明提取的乌骨藤总苷H，在动物体内抗肿瘤试验中，对小鼠移植性肿瘤S₁₈₀肉瘤及H₂₂实体瘤具有明显的抑制作用。

本发明中乌骨藤总苷H所包含的5种碳-21甾体皂苷是下列5个化学结构所示的5种甾体皂苷元之一与同一种糖链形成的5种糖苷，其中R为糖链。

通光藤苷元乙-I                                   通光藤苷元乙-II

通光藤苷元乙-III                                 通光藤苷元乙-IV

11-α-O-苯甲酰基-12-β-O-乙酰基-通光藤苷元乙

通光藤苷A中，苷元为通光藤苷元乙-I，R为3-O-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)-6-去氧-3-O-甲基-β-D-阿洛吡喃糖基-(1→4)-β-D-夹竹桃吡喃糖基。

通光藤苷B中，苷元为通光藤苷元乙-II，R为3-O-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)-6-去氧-3-O-甲基-β-D-阿洛吡喃糖基-(1→4)-β-D-夹竹桃吡喃糖基。

通光藤苷C中，苷元为通光藤苷元乙-III，R为3-O-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)-6-去氧-3-O-甲基-β-D-可洛吡喃糖基-(1→4)-β-D-夹竹桃吡喃糖基。

通光藤苷D中，苷元为通光藤苷元乙-IV，R为3-O-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)-6-去氧-3-O-甲基-β-D-阿洛吡喃糖基-(1→4)-β-D-夹竹桃吡喃糖基。