[发明专利]一种促肝细胞生长素溶液制备工艺

权利要求书

1.一种促肝细胞生长素溶液制备工艺，包括材料处理、活性成分提取、加热变性、固液分离和pH值调整，其特征在于：所述的活性成分提取采取酶或酸水解的化学提取法，所述的促肝细胞生长素溶液制备工艺包括以下步骤：

a、材料肝脏清洗步骤，用水把肝脏中的血水冲洗干净；

b、肝组织破碎步骤，将清洗干净的肝脏进行肝组织破碎；

c、活性成分提取步骤，在破碎的肝浆中加肝浆重量0.5～5倍的水，均匀搅拌成匀浆液，所述的酶水解提取法在匀浆液中加入肝浆重量0.05％～5％的酶进行酶水解，水解时间为0.5～10小时，所述的酸水解提取法用酸调节匀浆液的pH值至1.0～6.0之间后，放入温度为-5～-30℃的冷库中冻结5～40小时，冻结后取出在45℃以下水浴中解冻，再将解冻后的酸水解液用氢氧化钠调节pH值至6.0～7.0；

d、加热变性步骤，将酶或酸水解后的匀浆液加热至75～100℃，保温5～30分钟，使匀浆液中的大分子蛋白质变性沉淀；

e、固液分离和pH值调整步骤，将加热变性保温结束后的酶或酸水解液用冷却水冷却至常温，进行固液分离，分离后的清液用HCl/NaOH调整pH值至6.0～7.0，即得促肝细胞生长素溶液。

2.根据权利要求1所述的促肝细胞生长素溶液制备工艺，其特征在于：所述的“c、活性成分提取步骤”采用酶水解提取法加入的酶为木瓜蛋白酶或胰蛋白酶或胃蛋白酶或中性蛋白酶，酶的加入量为肝浆重量的2％，酶水解时间为8小时。

3.根据权利要求1所述的促肝细胞生长素溶液制备工艺，其特征在于：所述的“c、活性成分提取步骤”采用酸水解提取法加入的酸为盐酸或磷酸或醋酸，冷库的温度为-10±2℃，冻结时间为15±5小时。

4.根据权利要求2或3所述的促肝细胞生长素溶液制备工艺，其特征在于：所述的“b、肝组织破碎步骤”的肝组织破碎采用胶体磨匀浆破碎或超声波破碎。

5.根据权利要求4所述的促肝细胞生长素溶液制备工艺，其特征在于：所述的“e、固液分离和pH值调整步骤”分为两步：

e1、分离步骤，将加热变性保温结束后的酶或酸水解液用冷却水冷却至常温，用离心机进行离心固液分离；

e2、上清液超滤和pH值调整步骤，取离心分离后的上清液，用10～50KD的超滤膜超滤，将经过上述超滤的上清液用HCl/NaOH调整pH值至6.0～7.0，再用8～10KD的超滤膜进行超滤，超滤液即为促肝细胞生长素溶液。

6.根据权利要求5所述的促肝细胞生长素溶液制备工艺，其特征在于：所述的“c、活性成分提取步骤”中肝浆中水的加入量为肝浆重量的1倍，所述的“d、加热变性步骤”的加热温度为95±2℃，保温时间为15±5分钟，所述的“e2、上清液超滤和pH值调整步骤”中前后两次超滤分别使用50KD的超滤膜和10KD的超滤膜。