[发明专利]一种制备T载体的方法无效
| 申请号： | 200810059986.4 | 申请日： | 2008-03-07 |
| 公开（公告）号： | CN101240286A | 公开（公告）日： | 2008-08-13 |
| 发明（设计）人： | 周耐明;李果 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/64;C12N15/66 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310058浙江省杭州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 制备 载体 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备T载体的方法，包括以下步骤：
(1)在出发载体上插入XcmI和BfuI串联体盒，制备前T载体；
(2)用XcmI酶切前T载体，制得成熟的T载体；
所述的XcmI和BfuI串联体盒包括间隔序列、紧密连接于间隔序列两侧的各一个XcmI和BfuI串联识别序列，
所述的间隔序列为不含XcmI识别位点的任意DNA片段，
所述的XcmI和BfuI串联识别序列为GTATCCANNNNNNNNNTGG，N为任意碱基。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的出发载体为pBlueScript II SK、pBlueScript II KS、pUC18、pUC19、pUC118或pUC119。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的出发载体为pUC19。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述的pUC19的多克隆位点只保留HindIII和ECoRI酶切位点。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)中的XcmI和BfuI串联体盒插入HindIII和ECoRI酶切位点之间。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的间隔序列碱基数为3n个，n为自然数。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的间隔序列为人组胺受体hH4基因。
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