[发明专利]抗人Reg4的单克隆抗体及其制备与应用以及杂交瘤细胞株

权利要求书

1.一种抗人再生基因4的单克隆抗体，所述单克隆抗体对SEQ ID No.1所示核苷酸序列的第333～743位核苷酸编码的多肽具有特异性，所述的单克隆抗体由保藏编号为CCTCC No：C200728的细胞株分泌产生。

2.如权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于所述单克隆抗体对Reg4-his融合蛋白具有反应性，所述Reg4-his融合蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.如权利要求1或2所述的单克隆抗体，其特征在于所述单克隆抗体为IgG1亚型。

4.一种产生如权利要求1所述单克隆抗体的杂交瘤细胞株，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，保藏日期2007年10月1日，保藏编号CCTCC No：C200728。

5.如权利要求1所述单克隆抗体的制备方法，所述方法包括：用SEQ IDNo.2所示Reg4-his融合蛋白免疫小鼠，取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能够分泌对SEQ ID No.1所示核苷酸序列的第333～743位核苷酸编码的多肽具有特异性的单克隆抗体的杂交瘤细胞，从杂交瘤细胞上清液中或从注射杂交瘤细胞的动物腹水中，获得所述单克隆抗体。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于所述Reg4-his融合蛋白由以下方法获得：将含有SEQ ID No.3所示核苷酸序列的质粒载体转化大肠杆菌，IPTG诱导下获得Reg4-his包涵体，对Reg4-his包涵体进行纯化，得到所述的Reg4-his融合蛋白。

7.如权利要求1所述的单克隆抗体在检测Reg4基因及其编码蛋白在人组织中分布及表达的应用。

8.如权利要求1所述的单克隆抗体在制备检测试剂盒中的应用，所述检测试剂盒含有与标记物结合的单克隆抗体，所述标记物为荧光标记物、放射性标记物或酶标记物。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于所述检测试剂盒为结直肠癌早期检测试剂盒。