[发明专利]猪白色被毛纯合基因型的检测方法无效
申请号: | 200810060575.7 | 申请日: | 2008-03-28 |
公开(公告)号: | CN101255478A | 公开(公告)日: | 2008-09-03 |
发明(设计)人: | 赵晓枫;徐宁迎;郭晓令;赵丽莉 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人: | 周烽 |
地址: | 310027浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 白色 被毛纯合 基因型 检测 方法 | ||
1.一种猪白色被毛纯合基因型的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)获取猪耳组织基因组DNA。
(2)确定不同白色被毛基因型的差异。
(3)猪白色被毛基因KIT第18内含子的PCR扩增。
(4)白色被毛猪基因型I/I的纯合性检测。
2.根据权利要求1所述的猪白色被毛纯合基因型的检测方法,其特征在于,所述步骤(3)具体为:根据美国国立生物技术信息中心GenBank中的猪KIT基因第18内含子序列设计一对引物来体外扩增该突变区域序列,引物序列如下:K18F:5′-TGTGGGAGCTCTTCTCTTTAGG-3′;K18R:5′-ACTGGCATTCCGGGGTAG-3′,用此引物以猪基因组DNA为模板进行PCR扩增。
3.根据权利要求1所述的猪白色被毛纯合基因型的检测方法,其特征在于,所述步骤(4)具体为:全白色被毛猪基因组DNA中得到的PCR扩增产物经溴化乙锭EB染色,在2.5%琼脂糖10V/cm水平电泳1.5小时后,能清晰看到预计大小为161bp和165bp的两产物,凝胶成像系统拍照后利用系统自带分析软件分析每个个体两产物的光密度强度并计算其比例,当165bp比161bp的比值达到0.9~1范围,可确定该个体为纯合的白色基因型I/I个体,若该比值小于0.9,则可确定该个体为非纯合白色基因型。
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