[发明专利]一种提取植物DNA的方法无效
申请号: | 200810064903.0 | 申请日: | 2008-07-11 |
公开(公告)号: | CN101302509A | 公开(公告)日: | 2008-11-12 |
发明(设计)人: | 王玉成;刘桂丰;李慧玉;姜静;杨传平 | 申请(专利权)人: | 东北林业大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C07H1/06 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 | 代理人: | 荣玲 |
地址: | 150040黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提取 植物 dna 方法 | ||
1.一种提取白桦成熟叶片DNA的方法,其特征在于提取白桦成熟叶片DNA的方法按以下步骤进行:一、白桦成熟叶片用液氮研磨成粉末,然后取0.2g研磨粉末转入1mL提取缓冲液I中在温度为45℃的条件下水浴10min,再在10000g条件下离心10min;二、取步骤一离心沉淀物转入0.6mL提取缓冲液II中在温度为65℃的条件下水浴10min,之后加入0.6mL氯仿在12000g的条件下离心5min;三、取步骤二离心上清液并加入上清液等体积的异丙醇,混匀后在12000g条件下离心10min,再用体积浓度为75%、体积为0.5mL的乙醇洗涤离心沉淀2次,然后空气室温干燥,即得到白桦成熟叶片的DNA;其中步骤一中的提取缓冲液I由乙二胺四乙酸、NaCl和去离子水组成,提取缓冲液I中乙二胺四乙酸的浓度为50mmol/L、NaCl的浓度为0.16mol/L;步骤二中的提取缓冲液II由乙二胺四乙酸、NaCl、十六烷基三甲基溴化铵、十二烷基肌氨酸钠、巯基乙醇和去离子水组成,提取缓冲液II中乙二胺四乙酸的浓度为50mmol/L、NaCl的浓度为1mol/L、十六烷基三甲基溴化铵的浓度为2.5g/100mL、十二烷基肌氨酸钠的浓度为0.1g/100mL、巯基乙醇的浓度为1mL/100mL。
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