[发明专利]人源化抗CD25单链抗体及制备方法有效
| 申请号： | 200810066250.X | 申请日： | 2008-03-27 |
| 公开（公告）号： | CN101544695A | 公开（公告）日： | 2009-09-30 |
| 发明（设计）人： | 万琳;卢晓风;程惊秋;蔡华伟;陆燕蓉;李胜富;张杰;李幼平;步宏 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院 |
| 主分类号： | C07K16/28 | 分类号： | C07K16/28;C12N15/13;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 | 代理人： | 黄韧敏 |
| 地址： | 610041四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 人源化抗 cd25 抗体 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备人源化抗CD25单链抗体的方法，包括下述步骤：
1)构建基于daclizumab的重链可变区和轻链可变区的核苷酸序列，如SEQ ID No.4所示；
2)将所述核苷酸序列可操作地插入毕赤酵母pPIC9K，构建毕赤酵母表达 载体，表达载体结构如图2所示；
3)将步骤2)所述的毕赤酵母载体转化入毕赤酵母菌株；
4)在适宜条件下培养步骤3)所得的转化毕赤酵母菌株，诱导单链抗体 的表达；
5)分离纯化步骤4)所得培养产物即获得所述人源化抗CD25单链抗体；
其中步骤4)的诱导条件是BMMY培养基pH6.0，诱导物甲醇浓度为3.0％、 诱导起始浓度为OD600＝60、诱导时间为96h。
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