[发明专利]一种芒草的组织培养方法

权利要求书

1、一种芒草的组织培养方法，其特征是，它包括：

A、选取芒草顶端茎尖或根状茎作为组织培养的外植体；

B、对外植体进行处理；

C、将外植体放入培养基中诱导出愈伤组织块；

D、将愈伤组织块转移到新的培养基中，生长成愈伤组织胚状体；

E、将产生的胚状体移入新的培养基继续培养；

F、将形成的1～2毫米的愈伤组织胚状体用常规的组织培养技术进行地上部分的诱导；

G、将地上部分已诱导的小苗进行分离，进一步培养成苗。

2、根据权利要求1所叙述的一种芒草的组织培养方法，其特征是：选取芒草顶端茎尖为组织培养外植体时，包括顶端分生组织和未成熟花序。

3、根据权利要求1所叙述的一种芒草的组织培养方法，其特征是，外植体的处理步骤与方法包括：对作为组织培养外植体，先进行消毒处理，然后进行清洁处理；如是顶端分生组织和未成熟花序，还要去掉外面的包叶，将未成熟花序切割成小段。

4、根据权利要求1所叙述的一种芒草的组织培养方法，其特征是，愈伤组织诱导步骤包括：

①配置组织培养基，组织培养基为基本的MS培养基加上20g/l的蔗糖、750mg/l的氯化镁(MgCl₂·6H₂O)、2.5mg/l的2，4-D、0.5mg/l的BAP、12.5mmol/l的脯氨酸和0.8％的琼脂，其pH为5.5～5.8；

②外植体放在盛有上述培养基的培养器皿里，然后用膜将培养器皿封口包好；

③外植体先在黑暗中或弱光中，温度23℃～25℃下培养4～6个星期；

④当愈伤组织块诱导出来，然后转移到新的培养基中。

5、根据权利要求4所叙述的一种芒草的组织培养方法，其特征是：当愈伤组织块诱导出来之后，把胚状体愈伤组织分成0.3克～0.5克，或直径为0.4～0.6cm的小块，将所述各小块分别放在装有8ml～12ml的液体培养基的器皿中进行胚状体的诱导，该液体培养基为含有20g/l的蔗糖、750mg/l的氯化镁(MgCl₂·6H₂O)、2.5mg/l的2，4-D、0.5mg/l的BAP、12.5mmol/l的脯氨酸的MS培养基，培养温度25℃～30℃，光照强度5～8μmol/m²/s，每天照光时间为14～20小时，培养2～3个星期。

6、根据权利要求5所叙述的一种芒草的组织培养方法，其特征是：将胚状体放入装有35ml～40ml的液体培养基的器皿中，放在摇床上继续培育，2～3个星期之后转移到新的培养基中，1～2mm大小的愈伤组织形成后用常规的组织培养技术进行地上部分的诱导，该液体培养基为含有20g/l的蔗糖、750mg/l的氯化镁(MgCl₂·6H₂O)、2.5mg/l的2，4-D、0.5mg/l的BAP、12.5mmol/l的脯氨酸的MS培养基。