[发明专利]一种芒草的组织培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物的组织培养方法，尤其涉及芒草的组织培养方法。

背景技术

能源问题已成为全球最关注的话题之一，它不仅仅是面临短缺的问题，还与如何减轻温室效应有关。同样，温室效应也是全球面临的重大问题之一。面对这些难题，各国都在积极寻找开发新能源的有效途径，例如，开发利用太阳能、风能、水能、生物质能源等。太阳能、风能、水能、生物质能属于可再生的清洁能源，开发利用这些可再生的清洁能源，不但能有效地解决能源短缺的问题，还能减少CO₂的排放，减轻温室效应，有利于环境保护。

开发利用生物质能大有可为，沼气就是一种在我国已走进千家万户的生物质能源。将植物根、茎、叶等的干物质直接作为燃料进行发电等，也是近些年人们普遍思考的一个重大课题。为了推进这一设想的有效实施，就需要解决作为燃料的植物的品种选择、快速经济的繁育、大面积丰产栽培、机械化收割干燥处理等问题，走产业发展之路，形成快速经济的繁育——大面积丰产栽培——机械化收割干燥处理——利用的产业链。

芒草(Miscanthus x giganteus)为一种多年生草本C₄植物，高可达4米，丛生状。叶大部分基生，叶片扁平条形，长达1米。顶生总状花序，主轴四周为散房状穗状花序，小穗上有成束的丝状毛，秋季形成红色花序。喜阳光充足和湿润的沙壤土。芒属植物能适应多种类型土壤，具有良好的抗干旱能力。芒草(Miscanthus x giganteus)就是一种有开发前景的生物质能源植物品种。它不仅是有开发前景的生物质能源，还是优质的造纸原料。

但是，芒草(Miscanthus x giganteus)人工快速经济的繁育、大面积丰产栽培、机械化收割干燥处理等问题，全世界刚刚起步，国内还是一片空白，尤其首先要解决如何实现芒草的人工快速经济的繁育。现有技术中，芒属植物作为商业开发时人工繁育的成本高，不适宜大面积的人工种植。

发明内容

本发明旨在通过基因改良与组织培养，提供芒草(Miscanthus xgiganteus)一种人工快速经济的繁育技术，以实现芒草(Miscanthus xgiganteus)的人工快速经济繁育，适宜芒草大面积的人工种植，推进芒草的产业开发。

为了达到上述目的，完成上述任务，本发明一种芒草的组织培养方法包括：

A、选取芒草顶端茎尖或根状茎作为组织培养的外植体；

B、对外植体进行处理；

C、将外植体放入培养基中诱导出愈伤组织块；

D、将愈伤组织块转移到新的培养基中，生长成愈伤组织胚状体；

E、将产生的胚状体移入新的培养基继续培养；

F、将形成的1～2毫米的愈伤组织胚状体用常规的组织培养技术进行地上部分的诱导；

G、将地上部分已诱导的小苗进行分离，进一步培养成苗。

下面，对上述技术方案进行进一步阐述。

1、选取外植体：

选取芒草顶端茎尖为组织培养外植体时，包括顶端分生组织和未成熟花序。

2、外植体的处理步骤与方法：

对作为组织培养外植体，先进行消毒处理，然后进行清洁处理；如是顶端分生组织和未成熟花序，还要去掉外面的包叶，将未成熟花序切割成小段。

3、愈伤组织诱导步骤：

①配置组织培养基，组织培养基为基本的MS培养基加上20g/l的蔗糖、750mg/l的氯化镁(MgCl₂·6H₂O)、2.5mg/l的2，4-D、0.5mg/l的BAP、12.5mmol/l的脯氨酸和0.8％的琼脂，其pH为5.5～5.8；

②外植体放在盛有上述培养基的培养器皿里，然后用膜将培养器皿封口包好；

③外植体先在黑暗中或弱光中，温度23℃～25℃下培养4～6个星期；

④当愈伤组织块诱导出来，然后转移到新的培养基中。

4、胚状体诱导方法：