[发明专利]肠出血性大肠杆菌O157:H7志贺毒素2A1亚单位活性片段Stx2a1重组蛋白及表达方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体地说涉及一种肠出血性大肠杆菌O157:H7志贺毒素2A₁亚单位活性片段Stx2a₁蛋白的表达方法及应用。

背景技术

肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7于1975年被首次分离，因其能产生致死性志贺毒素(Shiga toxin，Stx)，1982年被确认为严重人兽共患致病菌。其感染具有暴发流行趋势、强烈的致死性和抗生素治疗可加剧病情的危险性等特点，已经成为全球公共卫生问题，对人类健康构成了巨大威胁。同时，EHEC O157:H7培养容易、感染力强、传播途径多样，使其极有可能作为未来军事战争的细菌武器和生物恐怖战剂；EHEC O157:H7的烈性致病因子还有可能用于基因重组新型生物武器——基因武器的构建。美国疾病控制中心(CDC)已将EHEC O157:H7列为B类生物恐怖病原体严加防范。

近年来，O157:H7 EHEC感染的暴发流行在世界各地接连发生，尤其是日本、美国等。美国食品和药品监督管理局(FDA)近期宣布，于2006年9月14日爆发的大规模大肠杆菌感染经流行病学调查已证实，病原菌即为EHEC O157:H7型。感染病例数上升迅速，发现感染病例的地区也已扩大到全美20个州。

中国江苏、安徽省曾于1999年暴发流行EHEC O157:H7感染性腹泻，患者超过2万例，死亡177例，流行时间7个月(http://www.szed.com/n/ca505201.htm)。这可能是迄今为止世界上流行规模最大的一次。2001年上述地区又发生疫情，并且范围扩大到西部、中原地区，甚至在东北、华北及华东少数地区也发生散发的O157:H7感染。目前中国已处于高发流行期，疫情不可能短期消失，必须引起全社会的高度重视。基于这种严峻的形势，中国已将肠出血性大肠杆菌列为21世纪可能对国人卫生健康有重大影响的12种病原微生物之一。

EHEC O157:H7多为食源性或水源性感染，人与人之间或人与家畜之间通过粪口途径传播。感染该菌可使人患腹泻、出血性结肠炎(Hemorrhagic colitis，HC)，还可引发溶血性尿毒综合症(Hemolytic uremic syndrom，HUS)及血栓性血小板减少紫癜(Thromboric thromobocytopenic porpura，TTP)等严重并发症，致死率达5～10％。临床研究证实：使用抗生素可促使O157:H7菌体破裂，“爆发性”释放致死性志贺毒素(Stx)，从而使患者死亡的危险性增加。因此，2002年中国卫生部制定的EHEC O157:H7感染性腹泻应急处理预案第5条有关病人的隔离治疗规定：“EHEC O157:H7病人和疑似病人(包括粪便标本O157:H7抗原胶体金方法检测阳性的腹泻病人)禁止使用抗生素，疫区内的其他一般腹泻病人应慎用抗生素。”。目前国内外尚无可用于治疗人EHEC O157:H7感染的特效药物。因此，寻求特异有效的O157疫苗来防治O157:H7感染已迫在眉睫。