[发明专利]重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白及制备方法

权利要求书

1.一种重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白，其特征在于：由靶向的FXa识别序列和抗凝血酶活性和抗血小板聚集的RGD-HV组成，所述融合蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：2所述。

2.根据权利要求1所述的抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白，其特征在于：RGD-HV的氨基酸具有SEQ ID NO：1序列，RGD序列位于水蛭素32-35突变位点；FXa识别序列为人FXa凝血因子的识别序列。

3.根据权利要求1所述的重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白，其特征在于：FXa识别序列位于融合蛋白的N-末端，RGD-HV位于融合蛋白的C-末端。

4.根据权利要求1所述的重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白，其特征在于：所述重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白的N端融合有一个9×His-tag。

5.根据权利要求4所述的重组靶向双功能水蛭素的融合蛋白，其特征在于：所述重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白与9×His-tag之间有一个肠激酶酶切位点。

6.编码权利要求1-5中重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白的DNA序列，具有SEQ ID NO：3的DNA序列。

7.包含权利要求5所述的DNA序列的重组表达载体pPIC9K/FXa-RGD-HV。

8.制备重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白的方法，包括用权利要求6重组表达载体转化毕赤酵母细胞，分离、纯化所述重组靶向双功能水蛭素的融合蛋白。

9.根据权利要求7所述的制备重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的融合蛋白的方法，其特征在于：表达系统的宿主为毕赤酵母GS115。

10.权利要求1所述的重组靶向抗凝血酶活性和抗血小板聚集的的融合蛋白用于制备静脉和动脉血栓性疾病的药物的用途。