[发明专利]联苯类化合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.联苯类化合物，其特征在于来源于红树林内生真菌次级代谢产物，红树林内生真菌为矮棒曲霉BYY-1(Aspergillus clavatonanicus BYY-1)，所述的联苯类化合物的结构式为：

为无色针状晶体，¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：6.73(d，J＝2.7Hz)，6.66(d，J＝2.8Hz)，4.61(s，2H)；¹³C-NMR(CD₃OD，400MHz)：144.3，121.9，115.4，151.7，114.5，132.1，61.1.HR ESI-Q-TOFm/z 279.1915[M+H]⁺，301.9705[M+Na]⁺，317.0409[M+K]⁺，具有生物活性、抗氧化性和抑癌细胞能力。

2.如权利要求1所述的联苯类化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)制备矮棒曲霉BYY-1(Aspergillus clavatonanicus BYY-1)的种子液

a.菌株的斜面培养：马铃薯去皮、切成小块，加水煮沸，纱布过滤，滤液中加葡萄糖和琼脂，海水定容，灭菌，制成试管斜面，得斜面培养基，挑取菌种接入斜面，培养，得培养的斜面菌种；

b.菌株的种子培养：在马铃薯汁中添加葡萄糖，海水定容，灭菌，得种子培养基，将上述培养的斜面菌种转接到分装后的种子培养基中，摇瓶培养，得种子液；

(2)制备矮棒曲霉BYY-1(Aspergillus clavatonanicus BYY-1)的发酵液

马铃薯去皮、切成小块，加水煮沸，纱布过滤，滤液中加葡萄糖，海水定容，灭菌，得发酵培养基，将种子液转接入发酵培养基，发酵后得发酵液；

(3)联苯类化合物的提取

将发酵液过滤得发酵液上清和菌体，发酵液上清用有机溶剂萃取，合并有机相减压浓缩得浸膏；

(4)联苯类化合物的精制

将浸膏用石油醚和甲醇分相，分别得到石油醚相和甲醇相，将甲醇相减压浓缩，用凝胶柱层析，有机溶剂洗脱，所得组分用正相硅胶柱层析，以石油醚和/或乙酸乙酯梯度洗脱，收集石油醚/乙酸乙酯的体积比例为(100～1)∶1洗脱液得到组分A；组分A用正相硅胶柱纯化，以氯仿和/或甲醇梯度洗脱，收集当氯仿/甲醇的体积比例为(100～10)∶1时的洗脱液，合并洗脱液，减压浓缩得联苯类化合物。

3.如权利要求2所述的联苯类化合物的制备方法，其特征在于在步骤(1)a中，所述的加水煮沸的时间为30min；所述的海水定容中的海水为10％～100％海水，海水定容后的每升斜面培养基含琼脂15～20g；海水定容后的每升斜面培养基含葡萄糖15～20g；培养的温度为25～32℃，培养的时间为2～8d。

4.如权利要求2所述的联苯类化合物的制备方法，其特征在于在步骤(1)b中，所述的在马铃薯汁中添加葡萄糖的比例是每升马铃薯滤液中加10～30g葡萄糖；所述的海水定容中的海水为10％～100％海水。

5.如权利要求2所述的联苯类化合物的制备方法，其特征在于在步骤(2)中，所述的加水煮沸的时间为30min；所述的在马铃薯汁中添加葡萄糖的比例是每升马铃薯滤液中加15～20g葡萄糖；所述的海水定容中的海水为10％～100％海水。

6.如权利要求2所述的联苯类化合物的制备方法，其特征在于在步骤(2)中，所述的将种子液转接入发酵培养基是将种子液按接种量5％～10％转接入发酵培养基中，在23～33℃下静置培养13～18d。

7.如权利要求2所述的联苯类化合物的制备方法，其特征在于在步骤(3)中，所述的发酵液上清用有机溶剂萃取至少3次，有机溶剂选自石油醚、乙酸乙酯、氯仿、二氯化碳中的一种。

8.如权利要求2所述的联苯类化合物的制备方法，其特征在于在步骤(4)中，所述的有机溶剂选自乙酸乙酯、氯仿、丙酮、甲醇中的一种。

9.如权利要求1所述的联苯类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

10.如权利要求1所述的联苯类化合物在制备用于医药品、化妆品及食品的抗氧化剂中的应用。