[发明专利]一种大批量快速制备PCR模板的方法

权利要求书

1.一种大批量快速制备PCR模板以进行PCR检测的方法，其特征在于通过以下步骤实现：

(1)量取等体积的Solution A和Solution B，添加灭菌双蒸水并充分混匀后得裂解液，备用；所述的Solution A为1mol/L KOH的水溶液；Solution B为20％Tween-20的水溶液；所述灭菌双蒸水的添加量为Solution A使用量的8倍；

(2)取50uL裂解液于离心管中，然后置测试材料于离心管的裂解液中，短暂离心后，在PCR仪上93～98℃保持10～15min；

(3)取出离心管并迅速放冰上；向离心管中加入50uL的Solution C，混匀，即可直接用作PCR反应模板；所述Solution C为TE缓冲液，组成成分为0.1M Tris-HCl和2mM EDTA的水溶液。

(4)模板的PCR检测，在PCR反应体系配制的过程中，先添加Solution D2.5uL/每管；然后进行PCR反应和电泳成像；所述Solution D为1％BSA水溶液。

2.根据权利要求1所述的一种大批量快速制备PCR模板以进行PCR检测的方法，其特征在于测试材料为供试作物的叶片，其使用量以能够完全浸入离心管的裂解液中为宜；

3.根据权利要求1或2所述的一种大批量快速制备PCR模板以进行PCR检测的方法，其特征在于作为测试材料的供试作物叶片为10mm²。

4.根据权利要求1所述的一种大批量快速制备PCR模板以进行PCR检测的方法，其特征在于所述的短暂离心为8000转/分离心，时间不超过10秒。

5.根据权利要求1所述的一种大批量快速制备PCR模板以进行PCR检测的方法，其特征在于Solution D先用20-25μm孔径的微孔滤膜过滤后使用。

6.根据权利要求2或3所述的一种大批量快速制备PCR模板以进行PCR检测的方法，其特征在于切取供试作物叶片的刀片，为一次性使用。