[发明专利]甘蔗宿根矮化病菌PCR快速检测方法无效
申请号: | 200810071436.4 | 申请日: | 2008-07-23 |
公开(公告)号: | CN101328501A | 公开(公告)日: | 2008-12-24 |
发明(设计)人: | 高三基;潘永保;陈平华;陈如凯;许莉萍;张华;徐景升 | 申请(专利权)人: | 福建农林大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 350002福建省福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甘蔗 宿根 矮化 病菌 pcr 快速 检测 方法 | ||
1、一种甘蔗宿根矮化病菌PCR快速检测方法,其特征在于具体步骤如下:
(1)提取蔗汁:在甘蔗的基部节间取蔗汁1~1.5mL置离心管A中,室温下3000rpm离心4~6min,取上清液300~400μL放入离心管B中,室温下12000rpm离心8~12min,弃上清,取沉淀;
(2)病菌裂解:在收集到的沉淀中加入50μL Buffer A,混匀,稍离心;95℃水浴10min,取出放置冰上3min;加入50μL Buffer B,混匀;稍离心后静置备用;所述Buffer A为100mM NaOH与2%Tween 20水溶液的混合液;Buffer B为100mM Tris-Hcl与2mM EDTA水溶液的混合液;
(3)模板PCR检测和电泳成像。
2、根据权利要求1所述的一种甘蔗宿根矮化病菌PCR快速检测方法,其特征在于所述稍离心为3000rpm离心5秒。
3、根据权利要求1或2所述的一种甘蔗宿根矮化病菌PCR快速检测方法,其特征在于所述静置备用,指置-20℃冰箱内备用。
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