[发明专利]用于生产肽的方法

说明书

本发明涉及用于形成二肽或更大的寡肽的方法。具体地，所述方法 涉及通过所谓的肽键将氨基酸或肽与预制的肽或氨基酸相连接的可行的 技术方案。本发明的方法遵循获得所述分子的常规方式，即保护-活化- 连接。

肽，尤其是二肽，是由至少两个氨基酸组成的化合物，所述氨基酸 通过第一个氨基酸的末端羧基原子和下一个氨基酸的α-N-原子经酰胺键 连接在一起。肽的形成是本领域熟知的(Bayer-Walter，Lehrbuch der or- ganischen Chemie，22.Auflage，S.Hirzel Verlag，Stuttgart，829ff.；The Chemical Synthesis of Peptides，J.Johnes，Oxford Science Publication，Clar- endron，1991)。它们是多能的化合物，可以用作用于手性合成的前体或 者用于药物目的，因为它们能够呈现出生物活性的潜能。

尽管本领域熟知有多种可用于肽形成的方法(见上面的文献)，但是 大多数已知的方法在进行大规模应用时都会遇到使用高价的或昂贵的原 材料以及复杂的技术条件的问题。

氨基酸由至少两个官能团组成：氨基和酸基。

为了氨基酸的定向偶联，必须保护第一个氨基酸的氨基并活化该氨 基酸的酸基。在碱性条件下可以发生与第二个氨基酸或酯或酰胺的偶 联。通过活化剩余酸基并与第三个氨基酸相偶联可以延长所形成的二 肽。可以重复这一过程，直至获得所需的肽长度，用合适的试剂裂解保 护基团。

用于氨基的保护基团对于本领域技术人员而言是已知的：

BOC(苄氧羰基)、Z(叔丁氧羟基)、Fmoc(芴甲氧羰基)、1，3-二羰基 化合物如乙酰乙酸酯、均三甲基苯-2-磺酰基。

利用以下试剂可以实现酸基的活化：

二环己基羰二亚胺(Dicyclohexylcarbonyldiimid)、叠氮基、混合酸 酐、N-羧酸酐等。(例如Advanced organic chemistry，March，Fourth Edition 1992，Wiley-Interscience，p.392，420-422，980；Bayer-Walter，Lehrbuch der organischen Chemie，22.Auflage，S.Hirzel Verlag，Stuttgart，829ff.； Organische Chemie，C.Vollhardt VCH，1990，pp.1261.；Houben-Weyl： Syntheses von Peptiden 1(15/1)，1974)。

E.Dane已经开发了用1，3-二羰基化合物(如乙酰乙酸乙酯和乙酰丙 酮)保护氨基酸的方法，在Angew.Chemie 1962，873以及Angew.Chemie 1964，342.中描述了这种方法。此外，它描述了如何将所形成的盐在酸基 活化之后与其他氨基酸和衍生物(如酯和酰胺)相连接。但是，所述的方 法被证实在大规模生产肽的产率和纯度方面都是不可靠的。

因此，仍然对用于评价其他用于大规模生产肽的可行的和有利的方 法存在需求。

因此，本发明的目的是提出另一种用于生产肽的方法，所述方法可 以容易地适用于工业规模的生产并显示出以高度可靠的产率和纯度提供 肽的优点。从经济学和/或生态学的角度看，本方法也优于现有技术。

这些目的可以通过应用本发明的方法实现。

在一项工艺中，通过实施用于生产肽的方法，其中所述方法包括：

a)在碱性条件下，使氨基酸或肽与1，3-二羰基化合物在有机溶剂中 反应；

b)任选地分离并干燥产物；

c)通过与惰性溶剂中的酰基氯的反应而活化产物；

d)在适当的介质中，用氨基酸衍生物或肽接触活化的产物；

e)如果需要，任选地重复操作步骤b)-d)；

f)将混合物的pH值调整为酸性pH值；

g)任选地加入水并分离所获得的水层；

h)从步骤g)的水层中分离出肽，以及任选地进一步纯化和任选地干 燥所述肽，