[发明专利]过滤式微量核酸临床样品快速处理方法有效
申请号: | 200810084367.0 | 申请日: | 2008-03-20 |
公开(公告)号: | CN101538567A | 公开(公告)日: | 2009-09-23 |
发明(设计)人: | 胡林;尤其敏;王宏莹;石翊轩 | 申请(专利权)人: | 杭州优思达生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68;C12Q1/02;C12M1/12 |
代理公司: | 北京东方汇众知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 陈代远 |
地址: | 310012浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 过滤 式微 核酸 临床 样品 快速 处理 方法 | ||
1.过滤式微量核酸临床样品快速处理方法,其包括以下步骤:
(a)用注射器抽吸临床微量核酸生物样品,样品经针头式过滤器过滤后,临床 生物样品中颗粒成分,包括:宿主细胞、细菌、细胞内的病毒和临床生物样 品中其它杂质,由于过滤器中过滤膜的物理阻挡而被留在过滤膜上,滤液则 为不含有颗粒成分的废液,达到固液分离的作用;
(b)用注射器抽吸生理盐水,清洗过滤膜上的颗粒成分,放弃滤液,完成了临 床样品中细胞和其他颗粒成分的富集和清洗;
(c)分离注射器和针头式过滤器,用注射器抽吸裂解液,连接针头式过滤器后 冲洗在滤膜上的细胞和其他颗粒成分进入单独的容器,使得洗脱细胞在与细 胞裂解液混合后裂解,得到混合液;
(d)用注射器抽吸裂解后的混合液,经过针头式过滤器的过滤,将细胞裂解后 的细胞碎片和杂质留在过滤膜上而得到不含有其他杂质的核酸水溶液,用于 核酸扩增。
2.根据权利要求1的方法,其中所述核酸为DNA或RNA。
3.根据权利要求1的方法,其中所述针头式过滤器的过滤膜选自硝酸纤维 素膜、醋酸纤维素膜、尼龙膜、混合纤维膜、聚偏氟乙烯膜、玻璃纤维膜、 聚四氟乙烯膜或聚醚砜膜。
4.根据权利要求3的方法,其中所述过滤膜的孔径为0.2-5.0微米。
5.根据权利要求3的方法,其中所述针头式过滤器选自尼龙膜针头式过滤 器或混合纤维膜针头式过滤器。
6.根据权利要求5的方法,其中所述针头式过滤器选自尼龙膜针头式过滤 器或混合纤维膜针头式过滤器;其中所述过滤膜孔径为0.2-5.0微米;其中所 述注射器为普通临床用一次性塑料注射器。
7.用于实施权利要求1-6的任何一项方法的过滤式微量核酸临床样品快速处 理试剂盒,其包括尖口吸管(1)、针头式过滤器(2)、注射器(3)和细胞裂解液。
8.根据权利要求7的试剂盒,其中所述注射器(3)为普通临床用一次性塑料 注射器。
9.根据权利要求7的试剂盒,其中所述针头式过滤器(2)选自尼龙膜针头式 过滤器或混合纤维膜针头式过滤器。
10.根据权利要求7-8的任何一项的试剂盒,其中所述针头式过滤器滤膜孔 径为0.2-5.0微米。
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