[发明专利]降糖中药类产品中非法掺入低极性降糖化学药物的定性分析检测方法

说明书

技术领域

本发明提供了一种降糖中药类产品中非法掺入低极性降糖化学药物的定性分析检测方法，属于药物质量检测体系。

背景技术

糖尿病已成为当前世界性卫生问题，我国糖尿病患病率也逐年增加，新增的患者主要为2型糖尿病，口服降糖药在这类患者的治疗中占有重要的地位。近年来，临床常用的降糖药物有双胍类和α-葡萄糖苷酶抑制剂等，民间也出现一些中药降糖制剂，其中有些中药制剂擅自添加西药成分，随意夸大疗效，有的病人误认为这些民间中药制剂是纯中药制剂，副作用小，可以大量服用，临床出现服用这些中药降糖药中毒的病人。因此，有必要建立灵敏、可靠的分析方法对中药降糖制剂中非法掺入的降糖药进行鉴定。

降糖化学药物一般可以分为磺酰脲类药物、双胍类药物、α-糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮类药物、非磺酰脲类的胰岛素促进分泌剂等几大类，其中磺酰脲类药物、非磺酰脲类的胰岛素促进分泌剂和噻唑烷二酮类药物有较低的水溶性，极性较低，为低极性降糖化学药物，与其它几大类的极性有明显差异。磺酰脲类药物的典型代表为格列本脲、格列吡嗪、格列齐特、格列美脲和格列喹酮；非磺酰脲类的胰岛素促进分泌剂的典型代表为瑞格列奈、那格列奈；噻唑烷二酮类药物的典型代表为罗格列酮、盐酸吡格列酮。

目前，已有采用高效液相色谱技术检测降糖中药类产品中掺杂的降糖化学药物，如申请号为200610016419.1的中国专利，用高效液相色谱方法测定盐酸甲基丙炔苄胺的含量，色谱条件与系统适用性试验为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾(10％磷酸调pH＝3)15∶85为流动相；检测波长为217nm；柱温40℃，理论塔板数按盐酸甲基丙炔苄胺锋计算，应不低于5000。但是该专利方法适用范围狭窄，仅能检测盐酸甲基丙炔苄胺一种降糖化学药物。

《6种口服降糖药的液相色谱-质谱分析》(分析测试学报，第19卷第6期，2000年11月，Page 5-8)一文中采用以下高效液相色谱条件对二甲双胍、盐酸苯乙双胍进行检测：流动相为体积比为65∶35的甲醇-5mmol/L醋酸铵缓冲液(pH3.5)，流速0.5ml/min；柱温为室温；进样量为20μL；

《RP-HPLC检测中药保健品中的西药降糖成分》(中国药学杂志第40卷第4期，Page 316-317)一文中采用RP-HPLC法对双胍类药物进行检测；色谱条件为：C18色谱柱(伊立特4.6mm×250mm，5μm；流动相：甲醇-离子对试液(庚烷磺酸钠0.5056g，加三乙胺1.4mL，加水至1000mL，用磷酸调节pH值至3.5±0.05)(30∶70)；流速：1.0mL·min^-1；进样量为：10μL，40μg·mL^-1，二极管阵列检测器及UV检测波长233nm；柱温为室温；理论板数按两个对照品峰计算应均不低于2000；

《反相液相色谱法同时测定六种降糖药西药成分》(现代科学仪器2006，6，Page89-91)一文中采用反相液相色谱法同时测定降糖样品中的盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、格列吡嗪、格列齐特、格列本脲、格列美脲等六种降血糖西药成分。色谱柱为Agilent C18柱，流动相为乙腈-0.02％磷酸溶液，梯度洗脱，波长229nm，流速1.0mL/min。17分钟可实现六组分的完全分离，各组分在一定范围内有良好的线性关系；

《液相色谱-串联四极杆质谱联用法测定中药降糖制剂中非法掺入苯乙双胍和格列齐特的研究》(药物分析杂志200525，Page 1453-1455)提供了一种检测非法掺入的苯乙双胍和格列奇特的专属性方法，HPLC条件为：色谱柱：ODS C18(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇-醋酸盐缓冲液(pH4.2)(50∶50)；流速：1.0mL min^-1；柱温30℃；进样量：20μL；检测波长：240nm；

《液相色谱-质谱联用法测定中药制剂中双胍类化学药物》(药物鉴定第16卷第17期，Page 15-16)用液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用法测定纯中药降糖制剂中非法掺入的双胍类化学药物，色谱条件为：色谱柱：Agelent C18柱(150mm×4.6mm，5μm)；流动相：0.02mol/L醋酸铵溶液(将醋酸pH调至3.5)-甲醇(70∶30)；流速0.3ml/min；柱温30℃；进样量：10μL；检测波长：235nm；