[发明专利]检测和纯化对HLA体系中存在的肽特异的CD8+T淋巴细胞群的方法

权利要求书

1.由重组HLA-A2单体形成的四体复合物，该四体复合物包括：

HLA-A2单体，在所述HLA-A2单体的α3结构域的245位氨基酸存在 由丙氨酸到缬氨酸的取代，和

链霉抗生物素分子，

其中每个HLA-A2单体与生物素分子偶联，且所述生物素分子与所述 链霉抗生物素分子相结合，从而形成四体复合物。

2.权利要求1的四体复合物，其带有抗原肽。

3.权利要求2的四体复合物，其中所述的抗原肽源自Epstein- Barr病毒的蛋白质。

4.权利要求2的四体复合物，其中所述的抗原肽源自Epstein- Barr病毒的BMLFI蛋白质。

5.权利要求2的四体复合物，其中所述的抗原肽源自巨细胞病毒 的蛋白质。

6.权利要求2的四体复合物，其中所述的抗原肽源自巨细胞病毒 的pp65蛋白质。

7.权利要求1～6中任一项的四体复合物在检测和/或分离肽特异 性CD8+T淋巴细胞群中的应用。

8.权利要求1～6中任一项的四体复合物在细胞分选方法中的应 用。

9.权利要求8的四体复合物的应用，其中细胞分选方法是免疫磁 分选方法。

10.用于从多克隆T淋巴细胞群中检测肽特异性CD8+T淋巴细胞的 方法，所述方法包括：

(a)将多克隆细胞群与权利要求2的四体复合物在允许所述四 体复合物和对所述四体复合物有亲和力的T淋巴细胞受体相互作用的条 件下接触；和

(b)检测T淋巴细胞对所述四体复合物的结合，其中与所述四体 复合物结合的所述T淋巴细胞被鉴定为肽特异性CD8+T淋巴细胞。

11.权利要求10的方法，其中通过使用流式细胞术进行所述检测。

12.用于从多克隆T淋巴细胞群中分离肽特异性CD8+T淋巴细胞的 方法，所述方法包括：

(a)将多克隆细胞群与权利要求2的四体复合物在允许所述四 体复合物和对所述四体复合物有亲和力的T淋巴细胞受体相互作用的条 件下接触，其中所述四体复合物偶联于磁珠上，

(b)回收包含结合于所述磁珠上的T淋巴细胞的磁珠，以此从多 克隆群中分离肽特异性CD8+T淋巴细胞，和，任选地，

(c)扩增分离出的肽特异性CD8+T淋巴细胞。