[发明专利]一种分离单个核细胞的方法和装置

权利要求书

1.一种分离单个核细胞的方法，其特征在于，包括

(1)、前处理

将脐带血、骨髓或外周血离心，离心条件为2400rpm、22℃下离心5min；将上层富血小板血浆层除去，然后加入适量质量百分比浓度为6％的羟乙基淀粉溶液和生理盐水；使得血液的红细胞比积为50-65％，其中羟乙基淀粉溶液和生理盐水的体积比为1∶4～1∶5；

(2)、加液

将经过步骤(1)前处理过的脐带血、骨髓或外周血倒入淋巴细胞分离液中，保持脐带血、骨髓或外周血和淋巴细胞分离液的界面清晰，前处理过的脐带血、骨髓或外周血与淋巴细胞分离液的体积比为2∶1；所述淋巴细胞分离液为Ficoll-Hypaque混合溶液；

(3)、离心

将步骤(2)所得的液体离心，离心条件为1000-1500rpm、22℃下离心30min；此时液体自上而下分为5层，分别为：含有少量血浆血小板的上清层、单个核细胞层、淋巴细胞分离液层、多核细胞层、红细胞层；

(4)、分离

将含有少量血浆血小板的上清层、单个核细胞层、淋巴细胞分离液层的上部取出，即为富含单个核细胞的液体；

(5)洗涤

在富含单个核细胞的液体中加入生理盐水，离心，弃去上清液，再加入生理盐水，同样的条件下离心，弃去上清液；剩下的部分即为单个核细胞液，离心条件为2200--2800rpm、22℃下离心7min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(5)最后所得的单个核细胞液中还加入生理盐水，以调整单个核细胞的最终浓度和体积。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的所有步骤在密闭系统中进行。