[发明专利]一种快速从同一样品中同时抽提纯化DNA/RNA的试剂盒以及方法有效
申请号: | 200810101602.0 | 申请日: | 2008-03-10 |
公开(公告)号: | CN101532011A | 公开(公告)日: | 2009-09-16 |
发明(设计)人: | 李乐攻 | 申请(专利权)人: | 首都师范大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京法思腾知识产权代理有限公司 | 代理人: | 杨小蓉 |
地址: | 100037北京市海淀区西*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 同一 样品 同时 提纯 dna rna 试剂盒 以及 方法 | ||
1.一种快速从同一样品中同时抽提纯化DNA/RNA的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括以下组分:
1)样品裂解液,
所述裂解液的配方为:
3.5-5.5M GuSCN
2-20mM MgCl2
10-50mM MES-NaOH,pH 6.3
10-30mM柠檬酸钠
1-10mM EDTApH8.0
0.005-0.3%TritonX-100
0.05-0.2%NP-40
0.01-0.8%N-月桂酰肌氨酸
1-8%丙醇
5-20ul/ml β-巯基乙醇;
2)结合柱前处理溶液,其配方为:
3.5-4.5M LiCl
0.005-0.02M HCl
0.05-0.3%TritonX-100;
3)DNA洗涤液I,其配方为:
4.5-5.5M GuHCl
5-20mM MES,pH5.5
0.5-3mM MgCl2
0.02-0.06%Triton X-100
45-60%乙醇;
4)RNA结合溶液,其配方为;
250-750mM MES-NaOH pH5.0
65-80%乙醇;
5)RNA洗液I,其配方为:
50-200mM MES-NaOH,pH5~6,
3.5-4.5M GuSCN
0.4-1%TritonX-100
35-45%乙醇;
6)DNA/RNA洗液II,
对于植物材料所述洗液II的配方为:
70-85%乙醇
0.5-1.5%丙酮
0.005-0.05%DEPC
对于其它材料所述洗液II的配方为:
70-85%乙醇和0.005-0.05%DEPC;
7)Rnase-free H2O;
8)DNA洗脱液,其配方为:
5-15mM Tris-HCl,pH8.0
1-2mM EDTA;
9)DNA结合柱,所述DNA结合柱由硅胶制成;
10)RNA结合柱,所述RNA结合柱由玻璃纤维材料制成;以及
11)过滤柱,所述过滤柱的过滤介质为氧化铝滤片。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述DNA结合柱由孔径为0.5-0.9μM的硅胶制成。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述过滤柱的过滤介质为5-10μM孔径的氧化铝滤片。
4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述RNA结合柱由孔径为0.3-0.8μM的玻璃纤维材料制成。
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