[发明专利]一种重组多型汉逊酵母菌及其专用重组表达载体与应用有效
| 申请号： | 200810101801.1 | 申请日： | 2008-03-12 |
| 公开（公告）号： | CN101255440A | 公开（公告）日： | 2008-09-03 |
| 发明（设计）人： | 何秀萍;陈志禹;王肇悦;郭雪娜;张博润 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/53;C12N9/04;C12N1/19;C12R1/78 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人： | 关畅;任凤华 |
| 地址： | 100080北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 多型汉逊 酵母菌 及其 专用 表达 载体 应用 | ||
1. 一种重组表达载体，是含有如下表达盒的重组酵母表达载体；所述表达盒从上游至下游依次包括甲醇氧化酶基因的启动子、尿酸氧化酶基因和转录终止子。
2. 根据权利要求1所述的重组表达载体，其特征在于：所述尿酸氧化酶基因为编码如下蛋白(a)或(b)的基因；
(a)由GenBank Acession No.BAA06804的自氨基末端第1-303位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；
(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基且具有尿酸氧化酶活性的由(a)衍生的蛋白质。
3. 根据权利要求1或2所述的重组表达载体，其特征在于：所述表达盒还包括酿酒酵母α因子信号肽的编码序列，所述酿酒酵母α因子信号肽的编码序列位于所述甲醇氧化酶基因的启动子和所述尿酸氧化酶基因之间，且与所述尿酸氧化酶基因形成融合基因。
4. 根据权利要求1或2所述的重组表达载体，其特征在于：所述甲醇氧化酶基因启动子为如下a)或b)的DNA分子：
a)GenBank Acession No.A11156的核苷酸序列自5′端1-1510位脱氧核糖核苷酸所示的DNA分子；
b)严格条件下与a)限定的DNA序列杂交的DNA分子。
5. 根据权利要求1或2所述的重组表达载体，其特征在于：所述酵母表达载体为pGAPZ-alpha-A。
6. 一种重组多型汉逊酵母菌，是将权利要求1-5所述的任一重组表达载体导入多型汉逊酵母菌中得到的重组菌。
7. 根据权利要求6所述的重组多型汉逊酵母菌，其特征在于：所述多型汉逊酵母出发菌株为多型汉逊酵母CGMCC 2.2498。
8. 根据权利要求6或7所述的重组多型汉逊酵母菌，其特征在于：所述重组多型汉逊酵母菌为重组多型汉逊酵母菌HPMU6 CGMCC No.2351。
9. 权利要求6或7或8所述重组多型汉逊酵母菌在生产尿酸氧化酶中的应用。
10. 根据权利要求9所述的应用，其特征在于：用于生产所述尿酸氧化酶的所述重组多型汉逊酵母菌的培养基为含1ml/100ml-4ml/100ml甘油的YPG培养基，优选为含4ml/100ml甘油的YPG培养基；在生产过程中，用0.5ml/100ml甲醇诱导所述尿酸氧化酶的表达。
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