[发明专利]定量测定植物中草药提取成分中雌二醇含量的方法

权利要求书

1.定量测定植物中草药提取成分中雌二醇含量的方法，应用雌二醇定量测 定试剂盒所提供的试剂，使用该试剂盒的使用说明书所提供磁分离酶联免疫法， 其特征是：将植物中草药提取液作为标本，按该试剂盒的使用说明书的步骤进 行操作；具体按下述三步骤：a、第一次孵育-免疫反应，b、第二次孵育-酶 反应，c、读取吸光值；

a、第一次孵育-免疫反应

a.1、吸取45ul各浓度标准品、质控品、标本，加之标记好的相应试管的底部；

a.2、加60ulE2抗试剂至各试管，混匀；

a.3、试管连架置37℃水浴20分钟；

a.4、加60ul E2衍生物至各试管，混匀；

a.5、试管连架置37℃水浴20分钟；

a.6、加60ul磁分离试剂至各试管，混匀；

a.7、试管连架置37℃水浴5分钟；

a.8、试管连架放入磁分离器，磁场中沉淀2分钟，确保每支试管底部都与分离 器表面接触；

a.9、用一大而缓慢的圆周运动倒转分离器，倒出上清液，把倒转的试管放在滤 纸上，用强有力的动作拍击分离器底部以除去粘在管壁上的所有液滴；

a.10、放正分离器，加150ul稀释后的清洗液至各试管；

a.11、放至涡旋机，激烈振荡，彻底混匀；

a.12、试管连架放人磁分离器，磁场中沉淀2分钟；确保每支试管底部都与分 离器表面接触；

a.13、用一大而缓慢的圆周运动倒转分离器，倒出上清液，把倒转的试管放在 滤纸上，用强有力的动作拍击分离器底部以除去粘在管壁上的所有液滴；

a.14、重复a.10-a.13步骤两次；

b、第二次孵育-酶反应

b.1、为磁分离免疫测定仪校零，准备1支空白试管，做好标记，放置试管架上；

b.2、从分离器取出试管架，加90ul基质至各试管，包括空白管；彻底混匀；

b.3、试管连架置37℃水浴30分钟；

b.4、加300ul终止液至各试管，包括空白管，其顺序与加基质顺序相同；

b.5、把试管架放人磁分离器，沉淀时间不少于10分钟；

c、读取吸光值

用空白管在550nm校零；在550nm、492nm读取标准品、质控品、标本的吸 光值；

操作步骤中所应用的E2抗试剂、E2衍生物、E2标准品、磁分离试剂、稀 释清洗液、基质、终止液、质控品、标准品由雌二醇定量测定试剂盒提供；

雌二醇定量测定试剂盒的批准文号为：国药准字S20060022。

2.根据权利要求1所述的定量测定植物中草药提取成分中雌二醇含量的方 法，其特征是：植物中草药提取液是沙棘叶提取物。

3.根据权利要求1所述的定量测定植物中草药提取成分中雌二醇含量的方 法，其特征是：植物中草药提取液是葛根提取物。

4.根据权利要求1至3任意一项所述的定量测定植物中草药提取成分中雌 二醇含量的方法，其特征是：雌二醇定量测定试剂盒由北京倍爱康生物技术有 限公司生产。