[发明专利]一种钩端螺旋体属特异性抗体胶体金快速检测试纸条

权利要求书

1.一种检测试纸条，包括反应膜和结合物释放垫，所述反应膜 具有同时包被钩端螺旋体属特异性抗原ompL1和LipL32的检测带和 包被兔抗钩端螺旋体属特异性抗原的多克隆抗体的质控带；所述结合 物释放垫包被有胶体金标记的钩端螺旋体属特异性抗原ompL1和 LipL32；所述反应膜为硝酸纤维素膜，结合物释放垫为玻璃纤维膜； 所述胶体金标记的钩端螺旋体属特异性抗原ompL1和LipL32是通过 以下方法制备的：将混合的表达蛋白ompL1和LipL32按1:1混合， 胶体金标记的pH值为8.4，胶体金和抗原的配比为50μg/ml胶体金； 标记的胶体金-抗原结合物经稳定剂处理后，按每平方厘米65μl的量， 均匀吸附于玻璃纤维上，冷冻干燥，并在干燥环境中保存，所述稳定 剂配方为0.5%BSA，pH8.0，0.01M Tris缓冲液；

硝酸纤维素膜上包被抗原的方法为：将表达蛋白ompL1和LipL32 按1:1混合，用0.01M PBS稀释成3mg/ml，将抗ompL1和LipL32的多克 隆抗体用0.01M PBS稀释成2mg/ml，用喷膜机将二者以1μl/cm的量喷 于硝酸纤维膜上，分别形成检测线和对照线，两条线之间的间隔为 0.5cm，把固定有抗原抗体的硝酸纤维置37℃烤箱中干燥2小时，干燥 环境中保存备用。

2.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于，其中所述钩端螺 旋体属特异性抗原ompL1和LipL32是应用基因工程方法重组表达获 得。

3.一种制备权利要求1~2任一项所述试纸条的方法，其包括如 下步骤：

1）制备钩端螺旋体属特异性抗原ompL1和LipL32；

2）将步骤1）制备的钩端螺旋体属特异性抗原ompL1和LipL32以 及兔抗钩端螺旋体属特异性抗原的多克隆抗体在反应膜上分别形成 检测带和质控带，备用；

3）用胶体金分别标记钩端螺旋体属特异性抗原ompL1和 LipL32，并包被到结合物释放垫中；

4）将制备后的反应膜以及结合物释放垫与样本垫、吸水垫和反 应支持物组装成试纸条。