[发明专利]Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg的17种类似物，其合成及在医学中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及多肽，尤其涉及以Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg为先导结构，变换C端氨基酸得到的 具有抗血栓活性的多肽，本发明还涉及该多肽的合成方法以及它们作为抗血栓剂的应用， 属于生物医药领域。

背景技术

细胞黏附在细胞黏附性疾病(癌转移、血栓形成、化学致炎和骨质疏松)的发展过 程中起关键作用。Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg是基底膜蛋白的一个片段，是Laminin受体的配基， 与正常细胞或肿瘤细胞表面的整合素也有很强结合能力，可参与细胞黏附过程。按照这种 知识，发明人认识到Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg有能力与Arg-Gly-Asp肽竞争血小板表面的整合素受 体，抑制血栓形成。发明人提出对Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg的羧端进行修饰，寻找具有优秀抗血栓 活性的Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg类似物。

发明内容

本发明目的之一是提供一类具有抗血栓活性的多肽；

本发明目的之二是提供一种合成上述具有抗血栓活性的多肽的方法。

本发明上述目的是通过以下技术方案来实现的：

具有抗血栓活性的多肽，其分子式为Tyr-Ile-Gly-Ser-AA，其中AA选自赖氨酸残基 (Lys)，脯氨酸残基(Pro)，缬氨酸残基(Val)，丙氨酸残基(Ala)，甘氨酸残基(Gly)， 苯丙氨酸残基(Phe)，色氨酸残基(Trp)，异亮氨酸残基(Ile)，丝氨酸残基(Ser)，苏 氨酸残基(Thr)，酪氨酸残基(Tyr)，蛋氨酸残基(Met)，半胱氨酸残基(Cys)，精氨酸 残基(Arg)，天冬酰胺残基(Asn)，谷胺酰胺残基(Gln)或谷氨酸残基(Glu)。

一种合成上述具有抗血栓活性多肽的方法，包括：

(1)将酪氨酸转变为Boc-Tyr；

(2)将赖氨酸，脯氨酸，缬氨酸，丙氨酸，甘氨酸，苯丙氨酸，色氨酸，异亮氨酸，O- 苄基丝氨酸，苏氨酸，酪氨酸，蛋氨酸，半胱氨酸，精氨酸，天冬酰胺，谷胺酰胺或谷氨 酸转变为苄酯；

(3)Boc-Tyr与异亮氨酸苄酯缩合制备Boc-Tyr-Ile-OBzl；

(4)将Boc-Tyr-Ile-OBzl转变为Boc-Tyr-Ile；

(5)将Boc-Tyr-Ile-OBzl与甘氨酸苄酯缩合制备Boc-Tyr-Ile-Gly-OBzl；

(6)将Boc-Tyr-Ile-Gly-OBzl转变为Boc-Tyr-Ile-Gly；

(7)将Boc-Ser(Bzl)与步骤(2)所制备的L-氨基酸苄酯转变为Boc-Ser(Bzl)-AA-Obzl， 其中AA选自赖氨酸，脯氨酸，缬氨酸，丙氨酸，甘氨酸，苯丙氨酸，色氨酸，异亮氨酸， 丝氨酸，苏氨酸，酪氨酸，蛋氨酸，半胱氨酸，精氨酸，天冬酰胺，谷胺酰胺或谷氨酸残 基；

(8)将步骤(7)所制备的Boc-Ser(Bzl)-AA-OBzl转变为HCl·Ser(Bzl)-AA-OBzl；

(9)在DCC、HoBt存在下，将Boc-Tyr-Ile-Gly与步骤(8)所制备的 HCl·Ser(Bzl)-AA-OBzl偶联得到Boc-Tyr-Ile-Gly-Ser(Bzl)-AA-OBzl；

(10)在氯化氢/乙酸乙酯存在下将Boc-Tyr-Ile-Gly-Ser(Bzl)-AA-OBzl转变为 HCl·Tyr-Ile-Gly-Ser(Bzl)-AA-Obzl，用Pd/C催化HCl·Tyr-Ile-Gly-Ser(Bzl)-AA-OBzl氢解得到 Tyr-Ile-Gly-Ser-AA；其中，所述的AA赖氨酸残基，脯氨酸残基，缬氨酸残基，丙氨酸残 基，甘氨酸残基，苯丙氨酸残基，色氨酸残基，异亮氨酸残基，苏氨酸残基，酪氨酸残基， 丝氨酸残基，精氨酸残基，天冬酰胺残基，谷胺酰胺残基或谷氨酸残基；

(11)在三氟醋酸和三氟加磺酸存在下，将Boc-Tyr-Ile-Gly-Ser(Bzl)-Cys-OBzl或 Boc-Tyr-Ile-Gly-Ser(Bzl)-Met-OBzl分别转变为Tyr-Ile-Gly-Ser-Cys或Tyr-Ile-Gly-Ser-Met。

上述方法中，步骤(1)中优选在NaOH、(Boc)₂O和二氧六环存在下将酪氨酸转变为 Boc-Tyr；