[发明专利]检测禽流感病毒的胶体金免疫渗滤增敏方法及其试剂盒

权利要求书

1.一种检测禽流感病毒的胶体金免疫渗滤试剂盒，其特征在于：装配包括

1）固定化渗滤试纸条A或B 100条；所述固定化渗滤试纸条A或B的制 备方法如下：

制备免疫渗滤试纸条A：沿长为40-110mm、宽为3-6mm的矩形聚乙烯塑 料基片长的方向设有孔间距为2－4mm的8－15个呈一行分布的直径为0.5-3 mm的圆形进样孔；将与聚乙烯塑料基片大小相同的硝酸纤维素膜片粘附于其下 面；加样时带有进样孔的聚乙烯塑料基片在上；

制备免疫渗滤试纸条B：切制8-15个直径0.5-3mm的圆形硝酸纤维素膜片 粘附于长为40-110mm、宽为3-6mm的矩形聚乙烯.塑料基片，膜片间距为3－4 mm；每个膜片下方的塑料基片上设有两个吸水孔，吸水孔是将与膜片圆心重叠、 与塑料基片长平行的长轴比膜片圆的直径长0.3mm、与塑料基片宽平行的短轴比 膜片圆的直径短0.2mm的椭圆未被膜片覆盖的部分去除得到的孔，加样时带吸 水孔的塑料聚乙烯基片在下面；

然后将禽流感病毒多克隆抗体在免疫渗滤试纸条A或B上固定化，采用点 样固定化法或浸泡固定化法之一；

最后将上述用点样法或浸泡法得到的固定化试纸条A或B，放入用双蒸水 稀释的重量百分比浓度为1-5％的牛血清白蛋白溶液中，37℃封闭20-60min；取 出，风干，得到待用固定化试纸条；4℃保存，备用；

2）磷酸盐缓冲液PBS100ml，置于塑料瓶中；

3）增敏试剂A试剂10mL，可检测100组试纸条；增敏试剂B试剂10mL， 可检测100条试纸条；

试剂A：配制重量百分比浓度为1％－10％的氯金酸水溶液；

试剂B：配制重量百分比浓度大于0.1-0.5%的抗坏血酸水溶液；

4）磷酸盐洗液PBST 100mL；

5）阳性对照抗原液，用PBS稀释成溶液中抗原重量百分比浓度为 0.05-0.1mg/mL的通用A型、H5、H7或H9型禽流感病毒抗原之一的溶液1ml；可 检测100条试纸条；

6）阴性对照液，未经禽流感病毒感染的尿囊液10mL；可检测100条试纸条；

7）金标探针试剂，取蛋白含量为10－20μg/mL的针对阳性对照的禽流感病 毒单克隆抗体探针液1000μL，放在小玻璃瓶中，抽成真空后封口，平时于4℃ 冰箱中保存；可检测100条试纸条；

8）塑料滴瓶10个、1－25μL量程的移液枪；

9）长、宽分别大于渗滤试纸条A或B的滤纸100张。