[发明专利]一种化学半合成制备博宁霉素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种博宁霉素的制备方法，属于抗生素的化学半合成 领域。

背景技术

博菜霉素族抗生素的分子结构：

博莱霉素A2  R＝-NH(CH₂)S(CH₃)

博莱霉素B2

平阳霉素    -NH-(CH₂)₃-NH-(CH₂)₄-NH₂

博安霉素    -NH-(CH₂)₃-NH-(CH₂)₄-NH-(CH₂)₃-NH₂

博宁霉素    -NH-(CH₂)₃-NH-(CH₂)₄-NH-(CH₂)₃-NHCOCH₃

其中，博宁霉素(Boningmycin)(专利号为98101253.1，发明名 称为一种抗肿瘤抗生素和其微生物发酵生产法)。博宁霉素不但具有 抗肿瘤作用，而且对银屑病、脂溢性皮炎和乳头瘤病毒所致的疾病如 尖锐湿疣、扁平疣等有良好的作用，毒性低，外用无刺激性，具有良 好的应用前景。但其通过发酵培养所产生的活性产物中博宁霉素仅占 约5％以下，甚至只有痕迹量。

因此，为了适应工业化生产，并能有效降低成本，本发明的技术 人员通过继续研究，发现了一种高产率的博宁霉素生产方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备博宁霉素的方法，该方法采用化学 半合成的方法将博安霉素乙酰化处理，使产生的博宁霉素收率达到 65～80％。

为了实现本发明目的，本发明所述的博宁霉素(Z-893)的制备 方法是采用博安霉素与酸酐进行乙酰化反应生成。

其中，博安霉素乙酰化处理为：将博安霉素溶于甲醇中，然后向 所获得的溶液中每毫升加入13～17μl的吡啶及10～13μl的醋酸酐， 室温下反应0.5～2h，反应液中加入丙酮，反应液与丙酮的体积比是 1∶3～6，过滤沉淀。

所述的博安霉素为含铜的博安霉素。该含铜的博安霉素可以是去 铜的博安霉素先转变为含铜的博安霉素再进行乙酰化，也可以直接用 博安霉素含铜品。

博安霉素加铜处理可采用：先将博安霉素溶于水中，加入Cu²⁺使充分螯合铜，经大孔吸附树脂柱脱去过量铜，浓缩洗脱液冷冻干燥， 得到含铜干燥品。

博安霉素乙酰化反应后得到博宁霉素(Z-893)，还需进一步处理： 先将过滤物溶于水中，经凝胶柱层析，并用0.1～0.8N NH₄Cl水溶液 进行梯度洗脱，按洗脱峰值为0.3～0.4mol/L收取，然后再经大孔吸 附树脂柱吸附，并用含5％NaCl和5％EDTA二钠盐的水溶液洗脱， 去除产物鳌合的铜；再用5％NaCl水溶液洗脱，去除EDTA，水洗除 盐后，用5～30％的丙酮(含0.01N HCl)溶液洗脱；收集活性流分， 经浓缩、冷冻干燥而得博宁霉素冻干品。收率达65～80％。

经HPLC检测，产物峰保留时间与博宁霉素相同，FAB-MS测定， 分子离子峰为1601.6与博宁霉素相同，表明该产物即为博宁霉素。

本发明所用的博安霉素可采用发酵方法制成，也可采用现有的其 他方法获得。

其中优选的是，博安霉素由如下方法制备：先将轮枝链霉菌平阳 变种菌种(Streptomyces verticillus Var.Pingyangensis n.var)进行发酵 培养得培养液，然后对培养液进行提取而成。

菌种优选为轮枝链霉菌平阳变种Q835(Streptomyces verticillus var Pingyangesis n.sp Q835)。