[发明专利]一种利用耐酸性细菌开放式发酵餐厨垃圾生产乙醇的方法无效
申请号: | 200810115663.2 | 申请日: | 2008-06-26 |
公开(公告)号: | CN101314781A | 公开(公告)日: | 2008-12-03 |
发明(设计)人: | 汪群慧;张文毓;马鸿志;赵芳妮 | 申请(专利权)人: | 北京科技大学 |
主分类号: | C12P7/08 | 分类号: | C12P7/08;C12N1/20;C12N15/01;C12R1/01 |
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地址: | 100083*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 耐酸 细菌 开放式 发酵 垃圾 生产 乙醇 方法 | ||
1、一种利用耐酸性细菌开放式发酵餐厨垃圾生产乙醇的方法,其特征在于,具体实施步骤为:
1)以运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis 10225为出发菌株,利用0.05~0.10mol/L的HCl溶液调液体葡萄糖基础培养基的pH为3.5~4.5,加入琼脂,制成固体培养基,将运动发酵单胞菌活化三代后,采用双层涂布法在准备好的固体葡萄糖基础培养基中进行菌株筛选,选取生长旺盛的菌株进行三轮酸性驯化,选取生长能力强的一株菌,接入液体葡萄糖基础培养基,制成菌株悬液;
2)将步骤1)的菌株悬液用无菌水稀释至每毫升106-108个细胞,取稀释液1~3ml置于培养皿中进行紫外照射,照射后,将诱变菌液在黑暗冷冻中保存1-2h,然后在红灯下稀释,在固体葡萄糖基础培养基上涂菌进行筛选,培养温度为30-35℃,时间为24-48小时,挑选长势良好的耐酸性运动发酵单胞菌株置于4℃左右的冰箱中保存;
3)将粉碎后的餐厨垃圾与水按1-2∶1的质量比进行混合,用稀盐酸将其pH调节到3.5-4.5,得到餐厨垃圾的发酵培养基,按每克餐厨垃圾发酵培养基接入50-150U的糖化酶和蛋白酶,然后将步骤2制得的耐酸性运动发酵单胞菌接入液体葡萄糖基础培养基培养24~36h,得到接种液,并按照每100g餐厨垃圾发酵培养基5-10ml运动发酵单胞菌的比例接入经紫外诱变的耐酸性运动发酵单胞菌,在30-35℃的密闭发酵摇瓶中进行不灭菌的厌氧发酵,发酵时间为24-48小时,最后蒸馏提纯,得到乙醇。
2、如权利要求1所述的利用耐酸性细菌开放式发酵餐厨垃圾生产乙醇的方法,其特征在于,使用的Zymomonas mobilis 10225出发菌株为中国工业微生物菌种保藏中心的运动发酵单胞菌。
3、如权利要求1所述的利用耐酸性细菌开放式发酵餐厨垃圾生产乙醇的方法,其特征在于,所述液体葡萄糖基础培养基的组分及配比为:葡萄糖100g,酵母膏5g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁0.5g,硫酸铵1g,水1000ml;所述固体葡萄糖基础培养基为在液体葡萄糖基础培养基成分基础上加入20g的琼脂。
4、如权利要求1所述的利用耐酸性细菌开放式发酵餐厨垃圾生产乙醇的方法,其特征在于,所述紫外照射的紫外灯功率为15-20W,紫外照射距离为20-30cm,照射时间为30~60秒。
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