[发明专利]小儿风热清合剂的质量控制方法

权利要求书

1.一种小儿风热清合剂的检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别和/或含量测 定方法中的一种或几种：

鉴别：

(1)取小儿风热清合剂10-50ml，加稀盐酸调pH值至1～2，置分液漏斗中，用溶 剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷提取1-3次，每次10-30ml，弃去溶剂乙醚、60～ 90℃石油醚或三氯甲烷液，再用乙酸乙酯提取2-4次，每次10-30ml，合并乙酸乙酯液， 水浴蒸干，残渣加甲醇1-5ml溶解，作为供试品溶液；另取牛蒡苷对照品，加甲醇制成 每1ml含1-5mg的溶剂，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色 谱法试验，吸取对照品溶液5μl、供试品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以三氯甲烷-甲醇-水为10-50∶1-10∶1-5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸 乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上 显相同颜色的斑点；

(2)取小儿风热清合剂10-50ml，加稀盐酸调pH值至1～2，置分液漏斗中，用溶 剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷提取1-3次，每次10-30ml，弃去溶剂乙醚、60～ 90℃石油醚或三氯甲烷液，再用乙酸乙酯提取2-4次，每次10-30ml，合并乙酸乙酯液， 水浴蒸干，残渣加甲醇1-5ml溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成 每ml含0.5-5mg的溶液作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱 法试验，吸取对照品溶液5μl、供试品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙 酸乙酯-丁酮-甲酸-水为3-10∶1-5∶0.1-5∶0.1-5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 1％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点；

(3)取小儿风热清合剂10-50ml，注入已处理好的内径1.5cm、柱高25cm的D101 型大孔吸附树脂柱内，先用100-500ml的蒸馏水以1-5ml/min的速度洗脱，弃去洗脱液， 再用50-95％的乙醇洗脱，收集洗脱液于100ml量瓶至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20-80ml 置蒸发皿，蒸干，残渣加甲醇1-5ml溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲 醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B 薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层 板上，以三氯甲烷-甲醇-乙腈-氨水为1-10∶1-5∶0.1-1∶0.1-1为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品 色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

(4)取小儿风热清合剂10-50ml，用氨试液调pH值至10，用溶剂乙醚、60～90℃ 石油醚或三氯甲烷萃取1-3次，每次10-20ml，分取溶剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲 烷液，蒸干，残渣加甲醇或乙醇1-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取连翘对照药材1-5g 加水50-100ml，煎煮10-60分钟，滤过，滤液浓缩至10-50ml，同法制备作为对照药材 溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验；吸取上述两种溶液各5μl， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇为2-10∶2-10∶1-5为展开 剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品 色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的颜色的斑点；

(5)取小儿风热清合剂10-50ml，加水5-20ml，摇匀，加稀盐酸调节pH值至1～2， 离心10分钟，分取上清液加溶剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷、乙酸乙酯10-30ml 振摇提取2-3次，蒸干，残渣加溶剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷、乙酸乙酯1-5ml 使溶解，作为供试品溶液；另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.1-1mg的溶液， 作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种 溶液各2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸为5-10∶0.1-5∶0.1-5 为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品 色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(6)取小儿风热清合剂10-50ml，用溶剂乙醚、365nm石油醚、三氯甲烷、乙酸乙 酯或水饱和正丁醇振摇提取1-3次，每次10-50ml，合并溶剂乙醚、60～90℃石油醚、三 氯甲烷、乙酸乙酯或水饱和正丁醇液，用2％氢氧化钠溶液10-30ml洗涤，再用溶剂乙醚、 60～90℃石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯或水饱和正丁醇洗涤2次，每次30ml，弃去洗液， 溶剂乙醚、60～90℃石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯或水饱和正丁醇溶液蒸干，残渣加甲 醇1-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取柴胡对照药材1-5g，加水50-100ml，加热微沸 1-5小时，滤液同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法 试验，吸取上述供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以三氯甲烷-甲醇-水为10-50∶5-30∶0.5-10为展开剂，展开，取出晾干，喷以2％对二 甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，60-100℃加热至斑点显色清晰；置365nm紫外光灯下检视； 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；

(7)取小儿风热清合剂10-50ml，置分液漏斗中，加溶剂乙醚、60～90℃石油醚、 三氯甲烷、乙酸乙酯或水饱和正丁醇10-30ml振摇提取1-3次，分取溶剂乙醚、60～90 ℃石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯或水饱和正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作 为供试品溶液；另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.1-1mg的溶液，作为对照品 溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10 μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水为 2-10∶1-5∶0.1-3∶0.1-5为展开剂，展开，取出晾干，喷以2％三氯化铝乙醇溶液，在 105℃加热数分钟，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位 置上，显相同颜色的荧光斑点；

含量测定：

精密量取小儿风热清合剂10-50ml，注入已处理好的内径1.5cm、柱高25cm的D101 型大孔吸附树脂柱内，先用100-500ml的蒸馏水以1-5ml/min的速度洗脱，弃去洗脱液， 再用50-95％的乙醇洗脱，收集洗脱液于100ml量瓶至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即 得供试品溶液；精密称取经五氧化二磷减压干燥12小时以上的栀子苷对照品10mg，置 25ml量瓶中，加甲醇溶解至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度， 摇匀，每1ml中含栀子苷40μg，即得对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂， 乙腈-水为5-30∶95-70为流动相，检测波长238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于 2000；照高效液相色谱法测定，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl注入液 相色谱仪，测定，即得，每1ml小儿风热清合剂含栀子以栀子苷C₁₇H₂₄O₁₀计，不得少于 0.16mg。