[发明专利]一种测定蜂王浆新鲜度的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种食品质量检测方法，具体是涉及一种蜂王浆新鲜 度的测定方法。

背景技术

蜂王浆是蜜蜂哺育蜂咽下腺和上颚腺共同分泌，用以饲喂蜂王和 1～3日龄蜜蜂幼虫的浆状物质，在蜜蜂的级型分化中发挥着重要作 用。蜂王浆含有丰富的生物活性物质，对人体具有诸如抗疲劳、抗菌 消炎、抗肿瘤、降血压、促生长等方面的营养保健作用，在保健食品、 医药、化妆品等领域具有很高的应用价值。卓越的营养保健效果使得 蜂王浆及其制品风靡全球。随着国内人民生活水平的提高和保健需求 的增长，国内蜂王浆市场也正逐步壮大。

长期的科学研究和实践经验表明：蜂王浆适合在低温下贮存，其 品质和保健功效易受其贮存条件的影响，若贮存温度、时间适当，蜂 王浆保持“新鲜”，保健功效较好；若贮存温度过高或时间过长，蜂 王浆的物理性状、化学组成会发生变化，保健功效降低甚至丧失。也 就是说，蜂王浆的新鲜度和品质之间存在显著的相关性。

我国现行蜂王浆国家质量标准(GB/T 9697-2002)仅对包括10- 羟基-2-癸烯酸、蛋白质、总糖在内的一些理化指标作出了限量规定， 但这些指标无法评定蜂王浆的新鲜度，从而无法对蜂王浆的品质作出 准确评价。缺少新鲜度指标及相应的测定方法是现行蜂王浆国家质量 标准的一个缺陷，也是亟待解决的问题。

蜂王浆的新鲜度评价已经引起了国内外科研工作者的高度关注， 目前已经在多个方面开展了研究。并提出了多个蜂王浆新鲜度的间接 评价指标，如糠氨酸、游离氨基酸、色度、57kDa蛋白、10-羟基-2- 癸烯酸等的分析，但由于这些指标有些属于美拉德反应的中间产物， 本身并不稳定，且在不同的王浆中变化趋势并不一样；有些性质稳定， 在蜂王浆贮存过程中含量变化很小。因此，目前并没有一种可靠的蜂 王浆新鲜度测定方法。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提出一种适用于各种蜂王浆，可 如实测定蜂王浆新鲜度、评定蜂王浆品质的方法。

蜜蜂分泌出蜂王浆后，蜂王浆中就会存在一定量的三磷酸腺苷 (ATP)和核糖核酸(RNA)。在贮存过程中，蜂王浆中的ATP依次 分解为二磷酸腺苷(ADP)、单磷酸腺苷(AMP)、肌苷酸(IMP)、 次黄嘌呤核苷(HxR)和次黄嘌呤(Hx)。变化规律为：ATP会较快 地降解成其分解过程的中间产物IMP，而IMP分解为HxR和Hx的 速度相对较慢，且贮存温度越高，贮存时间越长，其分解量越大，而 HxR和Hx，尤其是Hx是ATP分解的终产物；另外，AMP和腺苷 (Adenosine)也会由RNA降解而来，而Adenosine在贮存中又会降 解为腺嘌呤(Adenine)。研究发现，蜂王浆中adenine、adenosine、 HxR和Hx的累积量与上述8种分解过程物质的质量和的比值(本发 明定义为F值)，与贮存时间和贮存温度存在线性相关，与蜂王浆的 品质也存在线性相关，且在不同的王浆中的变化趋势基本一致。因此， 本发明提出一种测定蜂王浆新鲜度、评定蜂王浆品质的方法，该方法 能够如实、准确地评价蜂王浆的品质和新鲜度。

因此，根据上述规律，本发明提供的蜂王浆新鲜度检测方法，包 括以下步骤：

1、定量测定蜂王浆中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、 单磷酸腺苷(AMP)、肌苷酸(IMP)、次黄嘌呤核苷(HxR)、次黄 嘌呤(Hx)、腺嘌呤(adenine)和腺苷(adenosine)的含量，可用液 相色谱法或紫外分光法测定各个成分的含量；

以液相色谱法为例：取蜂王浆样品0.5g，加入5ml 5％HClO₄， 充分混合，12000rpm离心10min。取上清液，加入700μL 6mol/L KOH和50μL 2mol/LNa₂CO₃，充分混匀后，12000rpm离心10min， 上清液用0.45μm滤膜过滤后，以50mmol K₂HPO₄为流动相，用液 相色谱仪测定各个成分的含量。

2、由以下公式计算蜂王浆的F值：

3、根据F值大小评判蜂王浆的新鲜度。