[发明专利]一种酶解提取山茱萸多糖的方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种酶解提取山茱萸多糖的方法。

(二)背景技术

中药山茱萸为山茱萸科植物山茱萸(Comus officinalis Sieb et Zu cc) 的干燥果肉，其味酸、涩、微温，归肝肾经，有补益肝肾、涩精固脱的功 效，是我国传统名贵的中药材。中医药临床研究证明山茱萸是治疗糖尿病、 冠心病和高血压病的主要药材。

目前国内外对山茱萸的研究主要集中在化学成分及药理作用方面，其 主要成分为环烯醚萜苷类、五环三萜酸及其酯类、鞣质类、挥发油类及多 糖类等，具有免疫调节、降低血糖、抗休克、抗心律失常、抗菌、抗炎、 抗衰老、抗癌、抗艾滋病和治疗不育症等药理活性。

多糖类物质是生命代谢不可缺少的重要物质，具有多种生物活性而成 为当今生物医药研究和开发的一大热点。传统的山茱萸多糖提取方法主要 是采用热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法提取。热水浸提法时间长、耗能 高、杂质含量高、收率低；酸或碱浸提法虽能提高提取率，但极易破坏多 糖的结构。另外，酸、碱浸提对设备有一定的影响，且需经中和反应，操 作程序较为繁琐，难以在工业化生产中得以广泛应用。

现有中国专利CN1511539“山茱萸提取物及其制备方法和用途”中 提及了一种山茱萸提取物及其制备方法和用途，该提取物中含有莫诺苷 25～50％、马钱素25～40％。目前还未有采用酶法处理提取山茱萸多糖的 报道。

(三)发明内容

本发明目的是提供一种酶解提取山茱萸多糖的方法，该方法可提高山 茱萸多糖的提取率及其多糖含量。由于避免了传统的热水浸提或酸、碱提 取对多糖结构的影响，可最大限度地保持多糖的活性。

本发明采用的技术方案是：

一种酶解提取山茱萸多糖的方法，所述方法包括：取山茱萸干燥果肉 粉碎制得山茱萸干粉，加入质量为山茱萸干粉质量15～60倍的蒸馏水， 加入酶于35～60℃、pH3.5～7.0下酶解0.5h～4h，酶解结束后灭酶，提取液 分离纯化得到山茱萸多糖提取物；所述酶为下列之一或其中两种以上的混 合物：①纤维素酶、②木瓜蛋白酶、③果胶酶、④淀粉水解酶，酶质量用 量为山茱萸干粉质量的0.1～24％。所用酶均采用市购商品酶，通常的，纤 维素酶酶活为10000U/g～30000U/g，木瓜蛋白酶酶活为600000U/g ～800000U/g，果胶酶酶活为20000U/g～40000U/g，淀粉水解酶酶活为1500 U/g～3000U/g。

所述分离纯化方法可按照常规方法进行，本发明中所述提取液的分离 纯化方法可如下：提取液离心取上清液，浓缩至体积为上清液体积的 1/2～1/6得到浓缩液，加入体积为浓缩液体积2～5倍的70％～100％(v/v) 乙醇，静置3h～15h，离心、冷冻干燥，得到山茱萸多糖。

通常的，所述山茱萸干燥果肉粉碎至30～150目。

优选的，所用酶为果胶酶和木瓜蛋白酶组成的复合酶，果胶酶质量用 量为山茱萸干粉质量的4％、木瓜蛋白酶质量用量为山茱萸干粉质量的 3.5％。

优选的，所用酶为果胶酶、纤维素酶和淀粉酶组成的复合酶，果胶酶 质量用量为山茱萸干粉质量的3％、纤维素酶质量用量为山茱萸干粉质量 的3％、淀粉酶质量用量为山茱萸干粉质量的3％。

具体所述方法如下：取山茱萸干燥果肉，粉碎至60～150目得山茱萸 干粉，加入质量为山茱萸干粉质量30～50倍的蒸馏水，加入质量为山茱 萸干粉质量的4％的果胶酶和质量为山茱萸干粉质量的3.5％的木瓜蛋白 酶，于45～55℃、pH5.0～7.0下酶解0.5h～2.0h，酶解结束后升温至80～100℃ 灭酶0.5h～2.0h，提取液离心取上清液，浓缩至体积为上清液体积的1/2～1/6 得到浓缩液，加入体积为浓缩液体积2～5倍的70％～100％乙醇，静置 6h～15h，离心(3000～6000r/min，10min～30min)、冷冻干燥，得到山茱萸 多糖提取物。

本发明方法相对于传统的热水浸提法可使山茱萸多糖提取率提高 10～50％，并可使山茱萸多糖含量提高15～80％。由于避免了传统的热水浸 提或酸、碱提取对多糖结构的影响，采用酶解处理提取山茱萸多糖具有条 件温和、易除去杂质、最大限度地保持多糖活性等优点。

(四)具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围 并不仅限于此：