[发明专利]一种抗氧化活性虫草多糖的提取方法

权利要求书

1.一种抗氧化活性虫草多糖的提取方法，其特征在于所述方法如下：

(1)将总糖含量为13～15g/L的虫草菌发酵废液浓缩至原体积的1/20～1/30得浓缩液1，浓缩液1加入2～5倍体积的蒸馏水稀释，4500r/min离心10min，取上清液，所述虫草菌发酵废液为虫草菌蝙蝠蛾拟青霉(Paecilonyces hepialid chen & Dai Cs-4)经发酵获得的发酵液去除菌丝体后的液体成分；

(2)步骤(1)上清液调pH至4.5～5.0，加入2～5倍体积的50％～100％乙醇，沉淀20～30min，4500r/min离心15min，取沉淀物；

(3)步骤(2)沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，60℃烘干，得到含有抗氧化活性虫草多糖的粗多糖粉末；

(4)将步骤(3)粗多糖粉末以50～100倍质量的蒸馏水溶解，调pH7.0～7.5，4500r/min离心5min去除不溶物，取上清液；

(5)取步骤(4)上清液，加入质量为粗多糖粉末质量50～100倍的蒸馏水，调pH为7.0～8.0，按4～6×10⁵U/g粗多糖的添加量加入胰蛋白酶，37℃保温酶解24h，4500r/min离心5min，取上清液，加入体积为上清液1/4的Sevag试剂，15～25℃振荡30min，4500r/min离心20min，取上层液体蒸馏去除有机溶剂，得多糖溶液；

(6)将步骤(5)多糖溶液以浓氨水调pH7.0～8.0，搅拌下滴加30％的H₂O₂溶液至多糖溶液呈淡黄色后，装入cut-of为14000Da的透析袋，蒸馏水中透析24h，去除小分子杂质后，将透析袋内溶液减 压浓缩至原体积的1/8～1/10得浓缩液2，加入体积为浓缩液2体积2～5倍的50％～100％乙醇，离心取沉淀，烘干，得到所述抗氧化活性虫草多糖。