[发明专利]蜂胶黄酮的提取、纯化技术及其抗癌机理

权利要求书

1.一种蜂胶黄酮的提取方法及纯化技术，其特征在于包括以下步骤：

取蜂胶药材，-10℃～-4℃冷冻8-12h后变硬变脆，用万能粉碎机将蜂胶粉碎 成粗粉，准确称取蜂胶样品于三角瓶中，按照每克加入水∶乙醇(80％)∶乙酸 乙酯＝10∶8∶2.5室温下冷浸过夜后，抽滤，滤渣再按照每克加入乙醇(80％)∶乙酸乙 酯＝5∶1进行微波提取，微波照射时间为30s，合并两次得到的滤液，减压回收溶 剂，提取物被浓缩。再将浓缩物用乙酸乙酯萃取三次，合并萃取液，用蒸馏水 洗涤蜂胶乙酸乙酯液，用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩，得到蜂胶黄酮的浓缩 提取液。

采用常见的芦丁标准曲线法测定浓缩提取液中蜂胶黄酮的含量。

采用吸附层析法(Adsorption Chromato～aphy)——梯度洗脱工艺从蜂胶浓缩 液中提纯蜂胶总黄酮。选用薄层层析用硅胶G作为层析吸附剂，石油醚-乙酸乙 酯为梯度洗脱剂，收集洗脱液备用。前段洗脱液颜色与溶剂颜色接近，真空负 压旋转蒸发浓缩洗脱液，回收溶剂得到少量乳白色腊脂样物质弃去。此后每次 收集洗脱液500ml，真空负压(负压为0.03～0.05mPa，水温45℃)旋转蒸发浓缩 洗脱液，回收溶剂，余下物用少量加热的乙酸乙酯超声溶解，形成过饱和溶液， 室温下析出结晶，分别收集不同时段得到结晶物。取少量结晶物质采用高效液 相色谱(HPLC)分析，成分相近者且黄酮含量高者合并，即为制备的蜂胶总黄酮。 精密称取10mg蜂胶总黄酮，置25ml容量瓶中，加80％乙醇溶解，稀释至刻度， 摇匀，作为蜂胶总黄酮样品液，按照上述标准曲线法测定此时蜂胶总黄酮的含 量。

2.以活性蜂胶黄酮提取物为主要成分用于预防和治疗对糖尿病、高血脂、高血 压、肿瘤、多种炎症、病菌引起的疾病等药物及药物组合物。

3.根据权利要求1中所述的对蜂胶原料的冷冻条件，其特征在于-10℃～-4℃之 间，冷冻8-12h，直到药材变硬、变脆而易于粉碎即可。

4.根据权利要求1中所述有机提取溶剂水∶乙醇(80％)∶乙酸乙酯＝10∶8∶2.5， 其特征在于该溶剂也可为水∶乙醇(95％)∶乙酸＝10∶9∶1或水∶乙醇(80％)∶ 乙酸乙酯＝10∶7∶5。

5.蜂胶黄酮提取物用于预防和治疗对糖尿病、高血脂、高血压、肿瘤、多种炎 症、病菌引起的疾病等。