[发明专利]一种快速提取和纯化植物病组织中病原菌DNA的方法无效
申请号: | 200810121328.3 | 申请日: | 2008-09-25 |
公开(公告)号: | CN101367858A | 公开(公告)日: | 2009-02-18 |
发明(设计)人: | 严蕾艳;马忠华;尹燕妮 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C07H21/04 | 分类号: | C07H21/04;C12N15/10 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 310027浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 提取 纯化 植物 组织 病原菌 dna 方法 | ||
1.一种快速提取和纯化植物病组织中病原菌DNA的方法,按如下步骤进行:
(1)取待测植物病组织,加入提取液后进行研磨,使组织破碎,再加入提取液,混匀后静置;所述的提取液由PVP、Tris-HCl、EDTA、NaCl、SDS和ddH2O组成,pH为8.0;
(2)将步骤(1)所得的混合液离心,分离得到上清液后加入无水乙醇,再次离心得到沉淀的DNA;
(3)将沉淀的DNA用70%乙醇洗涤,干燥后溶于无菌水,即为提取的DNA;
(4)将提取的DNA溶液过柱纯化。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的提取液的各组分的含量,以提取液总体积计:PVP:1-2g/100ml,Tris-HCl:200mM,EDTA:50mM,NaCl:20mM,SDS:1g/100ml,余量为ddH2O。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的研磨时间1-2min。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的离心条件为温度4℃,转速12000-15000rpm。
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