[发明专利]一种快速提取和纯化植物病组织中病原菌DNA的方法无效

专利信息
申请号: 200810121328.3 申请日: 2008-09-25
公开(公告)号: CN101367858A 公开(公告)日: 2009-02-18
发明(设计)人: 严蕾艳;马忠华;尹燕妮 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C07H21/04 分类号: C07H21/04;C12N15/10
代理公司: 杭州天勤知识产权代理有限公司 代理人: 胡红娟
地址: 310027浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 快速 提取 纯化 植物 组织 病原菌 dna 方法
【权利要求书】:

1.一种快速提取和纯化植物病组织中病原菌DNA的方法,按如下步骤进行:

(1)取待测植物病组织,加入提取液后进行研磨,使组织破碎,再加入提取液,混匀后静置;所述的提取液由PVP、Tris-HCl、EDTA、NaCl、SDS和ddH2O组成,pH为8.0;

(2)将步骤(1)所得的混合液离心,分离得到上清液后加入无水乙醇,再次离心得到沉淀的DNA;

(3)将沉淀的DNA用70%乙醇洗涤,干燥后溶于无菌水,即为提取的DNA;

(4)将提取的DNA溶液过柱纯化。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的提取液的各组分的含量,以提取液总体积计:PVP:1-2g/100ml,Tris-HCl:200mM,EDTA:50mM,NaCl:20mM,SDS:1g/100ml,余量为ddH2O。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的研磨时间1-2min。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的离心条件为温度4℃,转速12000-15000rpm。

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